IMMUNOCHEMICAL IDENTIFICATION OF A NOVEL RNP COMPLEX

ΟΙ ΠΟΛΥΠΛΟΚΕΣ ΔΙΕΡΓΑΣΙΕΣ ΠΟΥ ΑΦΟΡΟΥΝ ΣΤΗΝ ΩΡΙΜΑΝΣΗ ΤΟΥ PRE-MRNA ΕΙΝΑΙ ΓΝΩΣΤΟ ΟΤΙ ΕΠΙΤΕΛΟΥΝΤΑΙ ΜΕ ΤΗΝ ΕΝΕΡΓΟ ΣΥΜΜΕΤΟΧΗ ΠΥΡΗΝΙΚΩΝ ΡΙΒΟΝΟΥΚΛΕΟΠΡΩΤΕΙΝΙΚΩΝ ΣΥΜΠΛΟΚΩΝ (RNP). ΣΤΗΝ ΠΑΡΟΥΣΑ ΜΕΛΕΤΗ ΑΝΑΦΕΡΕΤΑΙ Η ΤΑΥΤΟΠΟΙΗΣΗ ΚΑΙ Ο ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΕΝΟΣ ΝΕΟΥ RNP ΣΥΜΠΛΟΚΟΥ. ΚΑΘΟΡΙΣΤΙΚΟ ΡΟΛΟ ΣΕ ΑΥΤΗΝ ΤΗΝ ΜΕΛΕΤΗ ΕΙΧΕ Η ΔΥΝΑΤΟΤΗΤΑ ΠΑΡΑΓΩΓΗΣ ΠΟΛΥΚΛΩΝΙΚΩΝ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΕΝΑΝΤΙ ΤΩΝ ΚΥΡΙΩΝ ΠΡΩΤΕΙΝΙΚΩΝ ΣΥΣΤΑΤΙΚΩΝ ΤΟΥ ΣΥΜΠΛΟΚΟΥ, ΜΕ ΤΗΝ ΒΟΗΘΕΙΑ ΤΩΝ ΟΠΟΙΩΝ ΚΑΙ ΜΕ ΜΙΑ ΣΕΙΡΑ ΑΝΟΣΟΧΗΜΙΚΩΝ ΜΕΘΟΔΩΝ, ΕΓΙΝΕ ΔΥΝΑΤΟΣ Ο ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΤΟΥ ΣΥΜΠΛΟΚΟΥ. ΤΟ ΝΕΟ ΑΥΤΟ ΣΥΜΠΛΟΚΟ ΛΟΙΠΟΝ, ΤΟΟΠΟΙΟ ΟΝΟΜΑΣΤΗΚΕ LNRNP ΣΥΜΠΛΟΚΟ ΑΠΟΤΕΛΕΙΤΑΙ ΑΠΟ ΕΝΑΝ ΠΛΗΘΥΣΜΟ ΕΤΕΡΟΓΕΝΩΝ, ΜΕΓΑΛΟΜΟΡΙΑΚΩΝ RNA ΚΑΙ ΑΠΟ ΠΕΝΤΕ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ ΜΟΡΙΑΚΩΝ ΒΑΡΩΝ 59,61, 72, 74 110 KD. ΤΟ LNRNP ΣΥΜΠΛΟΚΟ ΕΙΝΑΙ ΑΠΟΚΛΕΙΣΤΙΚΑ ΠΥΡΗΝΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΟ ΚΑΙ ΔΙΑΣΥΝΔΕΕΤΑΙ ΜΕ ΤΟΝ ΠΥΡΗΝΙΚΟ ΣΚΕΛΕΤΟ ΜΕΣΩ ΤΟΥ RNA ΣΥΣΤΑΤΙΚΟΥ ΤΟΥ. ΕΠΙΣΗΣ, ΟΠΩΣ ΦΑΝΗΚΕ ΑΠΟ ΠΕΙΡΑΜΑΤΑ ΜΑΤΙΣΜΑΤΟΣ IN VITRO, ΣΥΜΜΕΤΕΧΕΙ ΣΤΟ ΜΑΤΙΣΜΑ ΤΟΥ PRE-MRNA.THE MOLECULAR EVENTS INVOLVED IN PRE-MRNA PROCESSING ARE THOUGHT TO RESULT FROMCONCRETED RNA/PROTEIN INTERACTIONS TAKING PLACE IN A VARIETY OF NUCLEAR RIBONUCLEOPROTEIN COMPLEXES, GENERALLY REFERRED TO AS NUCLEAR RNP PARTICLES. IN THIS STUDY, WE REPORT THE IMMUNOCHEMICAL CHARACTERIZATION AND IDENTIFICATION OF A NOVEL NUCLEAR RNP COMPLEXES IN ORDER TO DECIPHER THE STRUCTURE AND EVENTUALLY THE FUNCTION OF THIS COMPLEX, WHICH IT WILL BE REFERRED TO AS LNRNP, WE UTILISED POLYCLONAL ANTIBODIES PRODUCED AGAINST THE PROTEIN COMPONENTS OF THE COMPLEX. IN A SERIES OF IMMUNOCHEMICAL EXPERIMENTS WE FOUND THAT LNRNP COMPLEX IS CONSIDERED OF AN HETEROGENOUS RNA POPULATION OF LARGE MOLECULAR SIZE AND OF 5PROTEINS WITH MOLECULAR WEIGHTS OF 59, 61, 72, 74, 110 KD. MOST IMPORTANTLY THE LNRNP COMPLEX WAS FOUND TO HAVE A DIRECT INVOLVEMENT IN THE IN VITRO SPLICING OF PRE-RNA