125. 8-Oksyguanina i 8-oksy-2’-deoksyoguanozyna – biomarkery oksydacyjnych uszkodzeń DNA w moczu pacjentów poddanych radioterapii

Promieniowanie jonizujące indukuje szereg uszkodzeń DNA. Istnieją dwie ścieżki reperujące uszkodzenia DNA: – naprawa przez wycinanie nukleotydów (NER) reprezentowana przez 8-oksy-2’ -deoksyguanozynę (8-oksydG) i naprawa przez wycinanie zasad (BER) reprezentowana przez poziom 8-oksyguaniny (8-oksyGua). Uszkodzenia DNA takie jak oksydacyjnie zmodyfikowane zasady i nukleotydy, są przy sprawnych systemach naprawy wycinane i bez dalszych zmian metabolicznych wydzielane do moczu.Cele pracy1. Analiza zawartości 8-oksy-2’-deoksyguanozyny i 8-oksyguaniny w moczu pacjentów poddanych radioterapii. 2. Odpowiedź na pytanie: Czy istnieje zależność między poziomem 8-oksy-2’-deoksyguanozyny i 8-oksy-guaniny a odpowiedzią kliniczną na napromienianie?Materiał i metodyka29 pacjentów z rozpoznaniem przerzutów do kości, jedno pole napromieniania 84 cm2–104 cm2 na skórze, promienie X-250kV, 1 frakcja, dawka 10Gy. Materiałem do badań był mocz z DZM przed i po napromienieniu. Do próbki 2 ml moczu dodawano znakowanych izotopowo wzorców {15N3, 13C}8-oksy-G i {18o-8-oksy-dG}. Oczyszczano metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC), zebrane frakcje poddawano analizie ilościowej za pomocą chromatografii gazowej ze spektometrią masową (GC/MS).Wyniki1. Stwierdzono spadek ilości 8-oksyGua w DZM po radioterapii w stosunku do ilości 8-oksy-Gua przed napromienianiem (p=0,002) 2. Nie stwierdzono różnic znamiennych statystycznie w ilości 8-oksydG. 3. W obu grupach chorych: z poprawą i bez poprawy klinicznej, zanotowano spadek wartości 8-oksyGua po radioterapii (p=0,01). 4. W grupie pacjentów z poprawą kliniczną, stwierdzono znamienny wzrost ilości w DZM 8-oksydG. Oznaczenia w grupie bez poprawy klinicznej nie wykazały różnic.Wnioski1. Spadek ilości wydalanej w moczu 8-oksyGua po radioterapii może świadczyć o tym, że naprawa uszkodzeń DNA ulega regresji, a komórki są kierowane na drogę apoptozy. 2. Wzrost zawartości 8-oksydG w DZM, w grupie z poprawą kliniczną, odzwierciedlałby masywne obumieranie napromieniowanych komórek guza i może posłużyć jako podstawa do opracowania prostego testu prognostycznego promieniowrażliwości komórek nowotworowych