The Role of Adenosine and Its Receptor s in the Pathophysiology of Antigen-Induced Early and Late Phase Bronchoconstriction in an Animal Model of Asthma

吸入性Adenosine 可於氣喘病患產生支氣管收縮作用，一般認為其乃經由其受體 促進發炎細胞釋出介質而引起支氣管收縮。此為期兩年的計劃目的在於建立一氣 喘動物模式，並研究Adenosine 及其受體在過敏元引起之早期與晚期呼吸道收縮 中所扮演之角色。在過去兩年的實驗中，我們已成功地利用OVA 誘導小鼠建立 一氣喘動物模式，且可用非侵襲性的方式連續偵測呼吸道阻力之變化，能較以往 更精準地界定過敏元誘導產生之早期及晚期支氣管收縮反應。AMP 支氣管激發 試驗發現過敏小鼠明顯有支氣管高反應性，而控制組則不明顯。利用HPLC 的方 式我們發現在氣喘小鼠之肺泡沖洗液中Adenosine 的濃度在早期和晚期收縮期分 別為12.2±0.79 和14.93±1.84 mM (p = NS)，相對於控制組則為0.52±0.08 mM. (both P < 0.05)。使用Adenosine A2a 受體選擇性抑制劑無法減輕或抑制過敏元誘導之 早期及晚期支氣管收縮。A1 受體與A2 非選擇性抑制劑則可稍減少早期收縮反 應，但無法抑制晚期收縮反應，且後者抑制早期收縮之能力較前者為強。 Adenosine A3 受體抑制劑則無法抑制過敏元誘導之早期及晚期支氣管收縮。顯示 Adenosine 引發過敏小鼠支氣管收縮可能經由A1 與A2b 受體而引發收縮介質之 釋放。我們利用即時(real-time) PCR 方法定量氣管及肺組織特異性AdenosineA2b 受體基因於過敏元產生之早期及晚期收縮期之表現與基礎值之差異。蛋白方面之 表現則利用A2b 受體之特殊抗體進行Western blot 定量。我們發現 A2b 受體 mRNA 表現於早期收縮反應並無增加，但於晚期支氣管收增加3.2 倍左右。A2b 受體蛋白於早期收縮反應並無增加，但於晚期支氣管收增加。免疫組織染色方面 我們發現在正常小鼠呼吸道上皮及肺組織中少有A2b 受體表現，而在氣喘小鼠 則有增加之現象。in situ hybridization 之分析則因技術問題尚未成功。這些結果 可對Adenosine 及其受體在氣喘的致病機轉得到進一步的確認，但adenosine 受 體抑制劑對氣喘之治療就此一動物模式之成效而言似乎並不理想