The relevance of blocking the ADP-receptor by clopidogrel for the platelet degranulation and -aggregation in patients with a coronary artery disease

Clopidogrel, ein irreversibler P2Y12 Rezeptorantagonist der Thrombozyten, hemmt die ADP-induzierte Plättchenaktivierung und damit letztendlich die Plättchenaggregation. Nach einer Thrombozytenaktivierung sekrieren die Plättchen Tissue factor (TF) und CD40L. P-Selektin (CD62P) lässt sich auf der Oberfläche aktivierter Plättchen nachweisen. Bei Patienten mit einem Akuten Koronarsyndrom (ACS) sind als Zeichen der erhöhten Plättchenfunktion erhöhte TF-Konzentrationen im Blut festgestellt worden1,2. Zur Bestimmung der Plättchenreaktivität stehen verschiedene Messmethoden zur Verfügung. Große interindividuelle Unterschiede im Ansprechen auf Clopidogrel wurden in der Literatur beschrieben, wobei die Inzidenz von sogenannten Clopidogrel „Low- respondern“ zwischen 5% und 25 % in Abhängigkeit vom Messverfahren schwankt3,4. Zur Bestimmung der Plättchenaggregation unter einer Therapie mit Clopidogrel bei Patienten mit einer Koronaren Herzkrankheit (KHK) wurden die Impedanzaggregometrie sowie die Bestimmung des Status der VASP- Phosphorylierung und die Messung des Oberflächenmarkers P-Selektin in dieser Arbeit benutzt. Neben Thrombozytenaggregationshemmern werden zur Therapie der KHK auch HMG-CoA Reduktasehemmer eingesetzt. Statine besitzen neben ihren den Fettstoffwechsel beeinflussenden Eigenschaften auch antithrombozytäre, antikoagulatorische und profibrinolytische Wirkungen5-8. In dieser Arbeit wurden 1) drei verschiedene Methoden zur Erfassung der Plättchenaggregation miteinander verglichen sowie der Einfluss einer Clopidogreldosis von 150 mg/Tag bei sogenannten Clopidogrel „Low-respondern“ auf die Reduzierung der Plättchenreaktivität untersucht; 2) der Einfluss von Clopidogrel auf die Höhe der zirkulierenden TF - Konzentration im Blut bei Patienten mit stabiler KHK, ST- Hebungs-Infarkt und bei gesunden Kontrollen untersucht. Besteht eine Beziehung zwischen der TF-Konzentration und der Thrombozytenreaktivität, gemessen an der sCD40L-Konzentration im Plasma? 3) analysiert, inwiefern die unter Clopidogreltherapie gehemmte Plättchen-degranulation und thrombozytäre Zytokinausschüttung durch eine Statintherapie mit 40 mg Atorvastatin im Vergleich zu einer Kombinationstherapie aus 10 mg Atorvastatin und 10 mg Ezetimibe weiter reduziert wird. Signifikante Korrelationen bestehen zwischen dem Status der VASP-Phosphorylierung und der Impedanzaggregometrie. Eine Clopidogreldosis von 150 mg/Tag führte nur bei sechs von zehn Patienten zu einer Reduktion der Plättchenaggregation. Ferner reduzierte die Therapie mit Clopidogrel die TF- Konzentration im Blut von Patienten mit stabiler KHK. Die Hemmung der Plättchendegranulation führte über eine verminderte Ausschüttung von TF aus den α-Granula zu einer Reduzierung der Plättchen vermittelten TF- Expression in Endothelzellen und Monozyten. Bei Patienten mit einem akuten Ereignis war diese Reduktion der TF-Konzentration unter Therapie mit Clopidogrel nicht zu beobachten. Bei vergleichbarer Reduzierung der LDL- Cholesterin Spiegel führte eine Monotherapie mit 40 mg Atorvastatin zu einer signifikanten Abnahme der Plättchenaggregation.Clopidogrel, an irreversible P2Y12 receptor antagonist, inhibits the ADP- induced platelet activation and finally the platelet aggregation. Activated platelets express Tissue factor (TF) and CD40L. Also P-selectin (CD62P) is exposed upon activation on platelet surface. Increased concentration of TF in blood were found in patients with an acute coronary syndrome1,2. Different tests are availabel for quantifying platelet function. In literature a large inter-individual variability in reply to clopidogrel is described. The incidence of so-called low-responder fluctuates from 5% to 25% depending on the diagnostic tests3,4. For measuring platelet aggregation beneath clopidogrel therapy we used the impedance aggregometry, the assessment of the state of VASP-phosphorylation and the flow cytometrical detection of P-selectin (CD62-P). In addition HMG-CoA reductase inhibitors (statins) were used for therapy in patients with coronary artery disease. Statins have also a lot of pleiotropic effects5-8. In this study 1) three different methods of measuring platelet aggregation were compared to each other. Furthermore, we examined whether doubling the clopidogrel dose to 150 mg/d in so-called clopidogrel low-responder would lead to a reduction in platelet aggregation. 2) We investigated the effect of clopidogrel on circulating TF in the blood of patients with stable CAD, ST-elevation myocardial infarction and healthy controls. Is there a relationship between plasma TF and the platelet degranulation marker sCD40L? 3) We analyzed if combined treatment with ezetimibe plus low-dose atorvastatin had different effects on platelet function and plasma chemokine levels than highe-dose therapy with atorvastatin alone. There were significant correlations between the state of VASP- phosphorylation and the impedance aggregometry. Doubling the clopidogrel dose to 150 mg/d was effective to reduce the agonist-induced platelet aggregation in only 6 of 10 patients. Moreover, clopidogrel reduced the TF concentration in the blood of patients with stable CAD. Lowering platelet degranulation may lead to a decrease in platelet release of TF and thereby to a reduction in platelet-mediated TF expression in endothelium cells and monocyte. No reduction in TF concentration in blood was found in patient with an acute coronary syndrome. A therapy with 40 mg/d atorvastatin but not with 10 mg/d ezetimibe plus 10 mg/d atorvastatin reduced significantly the platelet aggregation despite a similar decrease of LDL-cholesterol