Molecular characterization of chromosomal breakpoints in high-grade lymphoma/leukemia with t(2;8) translocation

Charakteristisch für das Burkitt-Lymphom ist eine Chromosomentranslokation durch die das Onkogen MYC in den Einflussbereich von Immunglobulingen- Enhancern gerät und dereguliert wird. Meistens handelt es sich um eine Translokation in den Schwerkettenlokus auf Chromosom 14. In etwa 10% der Fälle erfolgt die Translokation in den Kappa-Leichtkettenlokus auf Chromosm 2p11, in den Bereich der J-Segmente. Über die molekularen Pathomechanismen dieser Translokation ist nur wenig bekannt. Die bisher beschriebenen Bruchpunkte auf Chromosom 8 sind in einer großen Streubreite 3´von MYC lokalisiert und entziehen sich dadurch einer Darstellung durch konventionelle (Long Distance) PCR. Um diese Translokationsvariante besser zu verstehen war das Ziel dieser Arbeit die Entwicklung einer inversen Long Distance PCR zur Identifikation und molekularen Charakterisierung von Translaokationen, die den Kappalokus betreffen. Es wurde eine Population von n=51 zytogenetisch überwiegend uncharakterisierter B-Zell-Lymphome untersucht. In 7 Fällen konnte eine t(2;8) identifiziert und molekular beschrieben werden. Zusätzlich wurden die Bruchpunkte von drei t(2;8)-positiven Zelllinien molekular charakterisiert. Die lineare Distanz der gefundenen Bruchpunkte auf Chromosom 8 zu MYC reichte von wenigen hundert Basenpaaren bis weit über 500 Kilobasen. In der Mehrzahl der Fälle konnte der reziproke Bruchpunkt über konventionelle PCR dargestellt werden. Die Ergebnisse der Arbeit werden in Zusammenhang mit den derzeit gängigen Theorien zur Pathogenese diskutiert.Burkitt lymphoma and a subset of diffuse large B-cell lymphomas are characterized by chromosomal alterations affecting the MYC oncogene on 8q24. In most cases MYC is found juxtaposed to the immunoglobulin heavy chain (IGH) gene locus. Translocations to the immunoglobulin kappa (IGK) gene locus on 2p11 are observed in around 10% of cases. Little data exist on the molecular mechanisms leading to this aberration. The chromosomal breakpoints on chromosome 8 have been found dispersed over a large area 3' of MYC. In order to obtain a better understanding of this chromosomal translocation, the intention of this work was to develop a long-distance inverse PCR method for the identification of chromosomal translocations affecting the IGK locus. A number of cytogenetically mostly uncharacterized high-grade lymphomas was investigated and a MYC-IGK juxtaposition was identified in 7 patients and three t(2;8)-positive cell lines. The chromosomal breakpoints were molecularly characterized. The linear distance of the breakpoints on chromosome 8 to MYC ranged from some 100 bp to more than 0.5 MB. The reciprocal translocated allele could be characterized in the majority of cases. The results are discussed in light of the current understanding of t(2;8)/MYC-IGK-positive high-grade lymphoma