Estudo fitoquímico e propriedades biológicas das folhas de Bauhinia ungulata L., fabaceae

Orientador : Drª Marilis D. MiguelCo-orientador : Dr. Obdulio Gomes MiguelTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 17/07/2014Inclui referênciasÁrea de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: Este trabalho teve como objetivo realizar o estudo fitoquímico e biológico do extrato etanólico, frações e compostos isolados provenientes das folhas de Bauhinia ungulata L. (Fabaceae). As folhas secas foram submetidas aos ensaios farmacopeicos de determinação de água e cinzas totais. Extrato aquoso e etanólico foram submetidos a análise fitoquímica preliminar. O extrato etanólico foi particionado obtendo-se as frações hexano, clorofórmio, acetato de etila e residual. A fração acetato de etila foi submetida à cromatografia em coluna e cromatografia líquida de alta eficiência e compostos isolados foram identificados por ressonância magnética nuclear. O extrato etanólico e frações foram submetidos aos ensaios de toxicidade frente a Artemia salina; atividade hemolítica; doseamento de fenóis totais pelo método de Folin Ciocalteou; às atividades antioxidantes pelos métodos de fosfomolibdênio, DPPH e TBARS; alelopática determinado interferência das amostras sobre germinação, crescimento, conteúdo de clorofila e respiração, utilizando com espécies alvo a Lactuca sativa e Alium cepa e antibacteriana por meio de concentração inibitória mínima. O extrato etanólico foi submetido a ensaios farmacológicos de nocicepção induzida pela formalina, contorções abdominais induzidas por ácido acético, teste da placa quente, edema de pata induzido por carragenina, medida da atividade enzimática da mieloperoxidase e análise histológica e campo aberto em modelos in vivo. Os compostos isolados foram submetidos aos ensaios imunológicos utilizando neutrófilos humanos e de citotoxicidade por redução do MTT frente a linhagem celular SiHa de câncer de cólo de útero. Os resultados das análises farmacopeicas demostraram que o material utilizado no estudo encontra-se dentro dos parâmetros estabelecidos. Na análise fitoquímica preliminar foram detectados alguns grupamentos que serviram de guias para o isolamento principalmente de flavonoides. Da fração acetato de etila foram isolados os compostos astilbina, quercetina, engeletina, afzelina e canferol. Nos ensaios biológicos não foram observadas toxicidade sobre a Artemia salina e hemolítica nos modelos testados. Com relação ao teor de fenóis totais todas as amostras possuem estes compostos em sua constituição com destaque para FAE que apresentou teores elevados. Com relação a atividade antioxidante no ensaio do fosfomolibdênio, DPPH e TBARS destacou-se a FAE com resultados semelhantes aos padrões utilizados. No ensaio alelopático as amostras demostraram potencial fitotóxico variáveis nas duas espécies utilizadas como alvo influenciando os parâmetros avaliados. Não foi observada atividade antibacteriana das amostras frente as bactérias testadas. O extrato etanólico apresentou atividade antinociceptiva e anti-inflamatória frente aos modelos utilizados. Os isolados quercetina, engeletina e canferol monstraram-se ativadores de neutrófilos. Os compostos isolados não apresentaram citotoxicidade frente as células da linhagem SiHA nas concentrações utilizadas. Os resultados revelam atividade antioxidante, alelopática, antinociceptiva, anti-inflamatória do extrato e imunossupressora de compostos das folhas de Bauhinia ungulata.Abstract: This work aimed to carry out the phytochemical and biological studies of the extract ethanolic, fractions and isolated compounds from the leaves of Bauhinia ungulata L. (Fabaceae ). The dried leaves were subjected to pharmacopoeial tests to determine water and ashes. Aqueous and ethanolic extract were subjected to preliminary phytochemical analysis. The ethanol extract was partitioned obtaining the fractions hexane, chloroform , ethyl acetate and the remaining residual. The ethyl acetate fraction was subjected to column chromatography and high performance liquid chromatography and isolated compounds identified by nuclear magnetic resonance. The ethanolic extract and fractions were subjected to testing for toxicity against Artemia salina; hemolytic activity; determination of total phenols by Folin Ciocalteou, the antioxidant activities by methods phosphomolybdenum, DPPH and TBARS; allelopathic interference of samples given on germination, growth, chlorophyll content and respiration using to target the species Lactuca sativa and Allium cepa and antibacterial by minimum inhibitory concentration. The ethanol extract was subjected to pharmacological testing of nociception formalin-induced and writhing induced by acetic acid, hot plate test, paw edema induced by carrageenan, measure the enzymatic activity of myeloperoxidase, histological analysis and open field in models in vivo. The isolated compounds were tested for immunological assays using human neutrophils and cytotoxicity by MTT reduction compared to SiHa cell line of cervical cancer. The results for pharmacopoeial analysis showed that the material used in the study are within established parameters. Preliminary phytochemical analysis of some groups that served as guides for the isolation of mainly flavonoides were detected. The ethyl acetate fraction were isolated astilbin, quercetin, engeletin, afzelin and kaempferol. In biological tests on the Artemia salina and hemolytic activity models the samples showed no activity. With respect to total phenols all specimens contain these compounds in their constitution highlighting EAF that presented high levels. Regarding the antioxidant activity in the phosphomolybdenum, DPPH and TBARS assay the EAF was similar to standard. In allelopathic test samples demonstrated phytotoxic potential variables in the two species used as target with influence in all parameters evaluated. No antibacterial activity was observed across the bacteria samples tested. The ethanolic extract showed antinociceptive and anti- inflammatory activity against the tested models. The quercetin, engeletin and kaempferol isolates demonstrated activators of neutrophils. All compounds showed no cytotoxicity front SiHa cells line at the concentrations used. The results reveal antioxidant activity, allelopathic, antinociceptive, anti-inflammatory of extract and immunosuppressive by compounds from the leaves of Bauhinia ungulata