O uso da histopatologia por microscopia de luz em estudos com peixes dulcícolas em condições ambientais controladas

Orientador : Prof. Dr. Antonio OstrenskyCo-orientadora : Profª. Drª. Gisele Geraldine Castilho WestphalTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Zoologia. Defesa: Curitiba, 25/02/2016Inclui referênciasArea de concentraçãoResumo: A histopatologia por microscopia de luz é uma ferramenta bastante usada em estudos dos efeitos agudos e crônicos de xenobióticos em peixes e também na caracterização de enfermidades que os acometem. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência da histopatologia por microscopia de luz como biomarcador da exposição de peixes a diferentes agentes estressores, utilizando para isso índices analíticos quantitativos de impactos teciduais. A tese foi dividida em quatro capítulos. O primeiro é um artigo de revisão bibliográfica que aborda o uso da histopatologia de luz como ferramenta de análise branquial, hepática e renal em peixes. Foram analisados 50 artigos, que registraram a ocorrência de 32 alterações branquiais, 46 hepáticas e 40 renais. A presença destas alterações, entretanto, não foi relacionada a um tipo específico de agente estressor. A análise evidenciou divergências com relação à metodologia analítica adotada por diferentes autores, dificuldades no uso da nomenclatura descritiva de determinadas lesões e relacionados ao uso de diferentes índices histopatológicos quantitativos. O segundo capítulo teve por objetivos descrever e quantificar as alterações teciduais observadas em exemplares de Rhamdia quelen (jundiá) e em Metynnis maculatus (pacu) durante o tratamento contra a ictiofitiríase. Para isso foram utilizados três índices: o Índice do Órgão (Iorg), o Índice de Impacto Branquial (IIBr) e o Índice de Alterações Histológicas (IAH) (os mesmos índices foram aplicados nos capítulos 3 e 4). Não foi possível estabelecer uma relação de nexo causal entre as alterações observadas e a parasitose analisada. Foram evidenciadas diferentes respostas teciduais apresentadas pelas brânquias das diferentes espécies, quando do uso desses diferentes índices. O terceiro capítulo objetivou testar a sensibilidade de R. quelen e M. maculatus ao sal iodado e utilizar a histopatologia branquial e hepática como biomarcador da exposição dos animais ao sal. Foram registradas 10 alterações branquiais, além da presença do parasito I. multifiliis. Para exemplares de R. quelen, os animais expostos ao sal apresentaram maior prevalência de congestão, perda de adesão epitelial e edema que os animais do grupo controle. Os índices analisados de forma agrupada mostraram que os índices Iorg e IIBrT foram superiores para exemplares de M. maculatus enquanto que o IAH, foi superior para R. quelen. Para R. quelen, congestão hepática foi mais prevalente no tratamento do que no controle, sugerindo a ocorrência de um desequilíbrio hidroeletrolítico como fator desencadeador da congestão. No último capítulo foi testada a sensibilidade de R. quelen e M. maculatus à amônia e avaliada as respostas histopatológicas branquiais e hepáticas derivadas da exposição dos animais a este composto. Nas brânquias foram registradas 13 lesões teciduais. Em exemplares de M. maculatus foi observado o aumento do IIBrT da alteração hiperplasia de epitélio de acordo com o aumento da concentração de amônia. Para R. quelen o mesmo foi observado para congestão. Nenhuma das alterações observadas no fígado foi relacionada à concentração de amônia. Os índices Iorg e IIBrT analisados de forma agrupada mostram valores superiores para exemplares de M. maculatus. Entretanto, quando usado o IAH, valor superior foi observado para R. quelenAbstract: The histopathology by light microscopy is a widely used tool in studies of acute and chronic effects of xenobiotics in fish and also the characterization of diseases that affect. The objective of this study was to evaluate the efficiency of histopathology by light microscopy as a biomarker of exposure of fish to different stressors, making use of quantitative analytical indices of tissue impacts. The thesis was divided into four chapters. The first is a literature review article that discusses the use of light histopathology as gill analysis tool, liver and kidney in fish. 50 articles that reported the occurrence of 32 gill changes, 46 liver and 40 kidney were analyzed. The presence of these changes, however, was not related to a specific type of stressor. The analysis showed differences regarding the analytical methodology used by different authors, difficulties in the use of descriptive nomenclature of certain injuries and related to the use of different quantitative histopathology indices. The second chapter aimed to describe and quantify tissue changes observed in specimens of R. quelen (silver catfish) and Metynnis maculatus (pacu) during treatment against ictiofitiríase. For this we used three indices: the Board Index (Iorg), the Branchial Impact Index (BII) and Histopathological Alteration Index (HAI) (the same indexes were later applied in Chapters 3 and 4). Could not establish a causal relationship between the alterations observed and analyzed parasitosis. They were shown different tissue responses submitted by the gills of different species, when the use of these different rates. The third chapter aimed to test the sensitivity of R. quelen and M. maculatus to iodized salt and use the gill and liver histopathology as a biomarker of exposure of animals to salt. It recorded 10 gill changes and the presence of the parasite I. multifiliis. For copies of R. quelen, animals exposed to salt had a higher prevalence of congestion, loss of epithelial adhesion and edema than the control group. The indexes analyzed in an aggregated manner showed that Iorg and BIIT indexes were higher for M. maculatus copies while the HAI, was superior to R. quelen. For copies of R. quelen, liver congestion was more prevalent in treatment than in the control, suggesting the occurrence of an electrolyte imbalance as triggering factor of congestion. In the last chapter we tested the sensitivity of R. quelen copies and M. maculatus to ammonia and evaluated the gill and liver histopathologic responses derived from animal exposure to this compound. In the gills were recorded 13 tissue lesions. In M. maculatus specimens was observed the increase in epithelial hyperplasia BIIT changes according to the concentration of ammonia. R. quelen the same was observed for congestion. In relation to the liver five tissue changes were identified. None of them, however, was related to the concentration of ammonia. The Iorg and BIIT indices analyzed in grouped form show higher values for M. maculatus copies. However, when used HAI, higher than was observed for R. quelen