O efeito de extratos de plantas medicinais na quimiotaxia leucocitária in vitro

Orientador : Cid Aimbiré de Moraes SantosCo-orientadora : Almeriane Maria Weffort SantosDissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias da SaúdeResumo: Vários métodos in vitro têm sido empregados para a investigação das atividades biológicas de plantas usadas na medicina popular para o tratamento de processos inflamatórios. Os eventos associados à resposta inflamatória são complexos, sendo a quimiotaxia uma das etapas fundamentais desse processo, recrutando leucócitos para o local da lesão. Neste trabalho, investigou-se a influência dos extratos hidroalcóolicos de Chamomilla recutita (L.) Rauschert, Rauvolfia sellowii Muell. Arg, Hybanthus bigibbosus (St.-Hil) Hassler e Anchieta pyrifolia (Mart.) G. Don, conhecidas popularmente como camomila, pau-pra-tudo, canela-de-veado e cipó-suma, respectivamente, sobre a quimiotaxia de leucócitos humanos, estimulados a migrar contra um gradiente de caseína, utilizando-se o método de Boyden. Dexametasona foi utilizada como controle de inibição do procedimento experimental. Os resultados aqui apresentados demonstraram efeito inibitório significativo sobre a migração de polimorfonucleares induzida por caseína para todas as plantas testadas. Entretanto, essa atividade variou de intensidade conforme a concentração e a espécie estudada. Para a camomila, onde analisou-se uma amostra produzida em solo local e uma importada, observou-se um efeito inibitório máximo de cerca de 34%, para ambas, nas doses de 10 e 0,1 mg/ml, respectivamente, comparável aos 31% exercido pela dexametasona (10 M),. Para os extratos de pau-pra-tudo, canela-de-veado e cipó-suma, esses valores foram de aproximadamente 20, 15 e 8%, nas doses de 1000, 10 e 1ng/ml, respectivamente. De particular interesse, além do surpreendente efeito inibitório do extrato de camomila sobre a quimiotaxia dos leucócitos, foram os resultados observados quando essa atividade pôde ser parcialmente bloqueada pelo pré-tratamento dos leucócitos com as drogas morfina e naloxona, sugerindo a mediação desses efeitos via receptores opióides. Análise da composição do óleo essencial de ambas, com o objetivo de comparar qualitativa e quantitativamente seus componentes ativos, demonstrou inversão na constituição relativa dos óxidos derivados do a-bisabolol. Embora estudos mais aprofundados sejam necessários, os resultados aqui apresentados e as informações deles derivadas podem servir como uma base preliminar de dados, contribuindo para esclarecer a atividade antiinflamatória atribuída a essas plantas na medicina caseira. Palavras chave: plantas medicinais, migração leucocitária, receptores opióides, caseína, inflamação, quimiotaxia.Abstract: Several in vitro methods have been used for the investigation of the biological activities of herbal plants used in folk medicine for the treatment of inflammatory conditions. The events associated with the inflammatory response are complex, and chemotaxis is just one of the fundamental steps of such process, which recruits leukocytes to the inflammatory sites. In this study, we have investigated the ability of hydroethanolic extracts from Chamomilla recutita (L.) Rauschert, Rauvolfia sellowii Muell. Arg, Hybanthus bigibbosus (St.-Hil) Hassler and Anchieta pyrifolia (Mart) G. Don, locally known as camomila, pau-pra-tudo, canela-de-veado, and cipo-suma, respectively, in interfering with the human leukocytes migration induced by casein, using the Boyden chamber method. Dexamethasone has been used as a positive control for leukocyte inhibition in the same experimental approach. The data herein presented showed a significant inhibition of the caseininduced polymorphonuclear leukocytes migration for all plants studied. However, the intensity of such activity was variable according to the dose and plant tested. For camomila, the maximum inhibition effect was -34%, similar to the 31% found for dexamethasone. For pau-pra-tudo, canela-de-veado, and cipo-suma extracts the values found were 20, 15, and 8%, for the doses of 1000, 10, and 1^g/ml, respectively. Of particular interest, apart from the unexpected leukocyte inhibitory effects of camomila extract, were the results observed after treating these cells with the drugs morphine and naloxone, in which such activity could be partially blocked, suggesting that these effects might be opioid receptors' mediated. Analysis of the essential oil of both national and imported samples, with the aim of comparing the presence of active components, has shown an inversion of the relative constitution of the a-bisabolol derivative oxides. Although further studies are needed, the results and suggestions presented in this study may be useful to clarify the anti-inflammatory properties of these herbal medicines, supporting their ethno-medical application in the treatment of inflammation diseases. Key words: herbal plants, chemotaxis, leukocyte migration, opioid receptors, casein, inflammation, chemotaxis