Análise do número de cópias e da expressão dos genes FOSL1, GSTP1, NTSR1, FADD e CCND1 em carcinomas primários de mama sem e com metástases em linfonodos axilares

Orientador : Prof. Dr. Iglenir João CavalliCo-orientadora : Profª Drª Enilze Maria de Souza Fonseca RibeiroTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa: Curitiba, 24/09/2015Inclui referências : f.86-96Resumo: As alterações no número de cópias de DNA e na expressão gênica são fatores importantes no câncer de mama. Nosso objetivo foi investigar a possível associação dos genes FOSL1, GSTP1, NTSR1, FADD e CCND1, selecionados a partir de uma análise de CGHarray prévia, no desenvolvimento e na progressão dos tumores, assim como sua possível função como preditores de prognóstico. Com este objetivo, foram selecionadas amostras de pacientes com tumor primário sem (LN-) e com (LN+) metástase nos linfonodos axilares, e usando esse parâmetro como marcador da progressão da doença. O número de cópias de DNA e a expressão do RNAm foram analisadas utilizando ensaios TaqMan® em 137 tumores primários, sendo 53 LN- e 84 LN+. Todos os genes estudados mostraram aumento do número de cópias de DNA (58,07% da amostra total) com ênfase para os genes NTSR1, FADD e CCND1. Com exceção do gene FADD no grupo LN+, o nível de RNAm não mostrou dependência do número de cópias de DNA, sugerindo que outros mecanismos podem estar envolvidos na regulação. Em relação aos parâmetros clínicos e histopatológicos (tamanho, grau e estágio do tumor, expressão dos receptores hormonais e evolução clínica), não foi observada associação com as alterações de número de cópias de DNA. Os resultados indicam que o aumento do número de cópias em NTSR1, FADD e CCND1 provavelmente esteja envolvido nos estágios iniciais da tumorigênese mamária, uma vez que não foram observadas diferenças ao comparar LN- e LN+. Palavras-chave: Número de cópias de DNA, expressão gênica, câncer de mama, linfonodos, metástase, FOSL1, GSTP1, NTSR1, FADD, CCND1.Abstract: Changes in genes copy number and mRNA expression are important factors in breast cancer. We aimed to investigate the possible association of the genes FOSL1, GSTP1, NTSR1, FADD and CCND1, selected after previous array-CGH analysis, in tumor development and progression as well their possible role as prognostic predictors. With this objective, we selected samples from patients with primary tumors without (LN-) or with (LN+) metastasis in lymph nodes, taking this parameter as a marker of disease progression. The DNA copy number and mRNA expression were analyzed using TaqMan® assays in 137 primary breast tumors being 53 LN- and 84 LN+. All genes studied showed an increased copy number (58.07% of the total sample) with emphasis to NTSR1, FADD and CCND1. With the exception of FADD in LN+ group, the mRNA level did not show dependency of the copy number, suggesting that other mechanisms can be involved in the regulation. Regarding the histopathological and clinical parameters (tumor size, grade and stage, the hormonal receptors status and clinical evolution) no association with the copy number alterations were observed. The results indicated that the increased copy number in NTSR1, FADD and CCND1 is probably involved in the early stages of breast tumorigenesis, since no difference were observed when LN- and LN+ were compared. Key words: DNA copy number, gene expression, breast cancer, lymph node, metastasis, FOSL1, GSTP1, NTSR1, FADD, CCND1