TRPA1 kationcsatorna alanin mutánsainak létrehozása

A tranziens receptor potenciál ankirin 1 (TRPA1) nem szelektív kationcsatorna, mely elnevezését a kiemelkedő hosszúságú ankirin ismétlődést tartalmazó doménjéről kapta, a TRPA alcsalád egyedüli tagja. A fehérje homo- vagy heterotetramer struktúrát kialakítva lehetővé teszi a mono- és divalens kationok membránon keresztüli transzportját. A rendkívül sokféle sejttípusban (pl.:nociceptív neuronok, keratinociták, ízérzékelő sejtek...stb.) expresszálódó TRPA1 főként a fájdalmas mechanikai- és hőingerek által aktivált jelátviteli utak szereplője. Az általa ellátott feladatokból adódóan a csatorna gátlószerei, mint potenciális fájdalomcsillapítók a gyógyszeripar jelentős célpontjává váltak. Irodalmi adatok szerint a TRPA1 aktivációját elektrofil vegyületek által létrehozott, a fehérje N-terminális végén elhelyezkedő reaktív cisztein és lizin aminosavakon történő kovalens módosítás váltja ki, az azonban még nem teljesen tisztázott, hogy pontosan mely aminosavakon jön létre modifikáció. Ez alapján a munkacsoport kiválasztott öt darab cisztein aminosavat, melyeket in vitro "overlapping" mutagenezissel létrehozott pontmutáció segítségével eltérő aminosavra cserélünk. A módosítás után az említett ciszteinek esetleges szerepe jól tanulmányozható patch clamp technikával.MSc/MABiológus MScD