La velocità di eritrosedimentazione (VES) nel cane e nel gatto: studio comparativo tra due metodi, confronto con alcuni marker infiammatori e utilizzo in ambito clinico

Riassunto Introduzione La Velocità di EritroSedimentazione (VES o ESR, Erythrocyte Sedimentation Rate), è uno degli esami di laboratorio più eseguiti a livello mondiale e fornisce una misura del livello di infiammazione dell’organismo. Nonostante i suoi limiti e l’introduzione di altri marcatori più specifici di infiammazione, ancora oggi la VES è ampliamente utilizzata in medicina umana. In veterinaria la VES è stata da tempo abbandonata e sostituita dalla misurazione di alcune proteine di fase acuta dell’infiammazione. Obbiettivi Questo studio si proposto di indagare e valutare la determinazione della Velocità di EritroSedimentazione (VES) con metodica MINI-CUBE (VES-MC) in cane e gatto; analizzare la VES e gli altri marker infiammatori (WBC, Neutrofili, Neutrofili Banda, Albumina, Albumina/Globuline (A/G), Proteina C-reattiva (PCR) e Fibrinogeno) ed infine valutarne una sua possibile utilità in ambito clinica analizzando i valori della VES fra cinque diverse categorie di soggetti: patologie infiammatorie aspecifiche, patologie neoplastiche, patologie infettive, patologie immunomediate e sani. Materiali e metodi Sono stati impiegati 120 campioni di sangue canino e 60 di sangue felino. Per ogni campione sono state raccolte le informazioni circa il segnalamento, anamnesi, esame emocromocitometrico, esame biochimico ed è stata determinata la VES sia con tecnica MINI-CUBE, entro 2 ore dal prelievo, sia con metodo VES-W, entro 4 ore dal prelievo. Sia i campioni di sangue felino sia i campioni di sangue canino sono stati divisi in 3 popolazioni: campioni non anemici (HCT≥37% nel cane, HCT≥30% nel gatto), campioni anemici (HCT<37% nel cane, HCT<30% nel gatto) e popolazione totale (campioni anemici e campioni non anemici). Nel caso del cane è stata creata una sottopopolazione in cinque categorie (soggetti con patologie immunomediate, soggetti con infezioni, soggetti con infiammazione aspecifica, soggetti con neoplasie e soggetti sani) per la valutazione in ambito clinico della VES. La determinazione della VES-MC prevede l’impiego dello strumento MINI-CUBE (DIESSE, Diagnostica Senese S.p.A., Monteriggioni, SI, Italia) che misura la VES direttamente dalla provetta in EDTA fino a 4 campioni simultaneamente a random access. I risultati sono disponibili in 20 minuti e, grazie ad un’elaborazione automatica della scansione ottica effettuata dallo strumento, sono espressi in mm/h come nella tecnica VES-W. Per indagare e valutare la metodica VES-MC è stato eseguito: il calcolo del coefficiente di variazione intra-saggio ed inter-saggio; calcolo della correlazione (r) tra i valori VES-W e VES-MC; calcolo del coefficiente R^2; Test di Bland-Altaman; Test di regressione di Passing & Bablok; calcolo valore di riferimento metodica VES-MC; Calcolo del Kappa di Cohen; Calcolo Sensibilità, Specificità, Valore Predittivo Positivo e Negativo. L’analisi della VES e gli altri marker infiammatori è stata seguita tramite uno studio di correlazione (r) ed uno studio tramite il test di Kruskal-Wallis tra le misurazioni sia con la VES-W sia con la VES-MC e ciascun marker infiammatorio (WBC, Neutrofili, Neutrofili Banda, Albumina, A/G, PCR e Fibrinogeno). La valutazione della sua utilità in ambito clinica è stata effettuata tramite un’analisi tramite test Kruskal-Wallis tra i valori sia della VES-MC sia della VES-W fra le cinque diverse categorie di soggetti. Risultati Cane Per 5 (4,2%) campioni di sangue canino, lo strumento ha emesso il segnale ERR; in tutti questi soggetti la VES era risultata alterata, con valori uguali o superiori a 15 mm/h. Altri 5 (4,2%) soggetti hanno invece mostrato avere una VES-W difasica e quindi non determinabile con VES-MC. Prova sia intra-saggio (CV= 0,02) e inter-saggio (CV= 0,32); Correlazione VES-W e VES-MC (r=0.812 Pop Totale, r = 0.877 HCT≥37%, r = 0.766 HCT < 37% ); Coefficiente R^2 tra VES-W e VES-MC (R^2 = 0.66 Pop Totale, R^2 = 0.769 HCT≥37%, R^2 = HCT<37%); Test Bland-Altman (Media aritmetica delle differenza = -2.5, IC 95% = + 17.3 e -22.2 Pop Totale, Media aritmetica delle differenza = -1.8, IC 95% = + 9.3 e -13.0 HCT≥37, Media aritmetica delle differenza = -2.3, IC 95% = + 28.5 e -33.1 HCT<37 ); test di regressione di Passing & Bablok (presenza differenza sistematica dalla VES-W in HCT≥37% e HCT<37; presenza differenza proporzionale dalla VES-W in HCT≥37%); L’intervallo di riferimento della VES-MC del cane è risultato da 0 a 10 mm/h; Test Kappa di Cohen (0.77 Pop Totale, 0.77 HCT≥37%, 0.69 HCT<37%); Sensibilità (0.86 Pop Totale, 0.82 HCT≥37%, 0.77 HCT<37%), Specificità (0.96 Pop Totale, 0.95 HCT≥37%, 1.00 HCT<37%), Valore Predittivo Positivo (0.91 Pop Totale, 0.82 HCT≥37%, 1.00 HCT<37%) e Negativo (0.89 Pop Totale, 0.82 HCT≥37%, 0.69 HCT<37%). Nell’analisi di correlazione con i marker infiammatori e VES-W si ha la presenza di risultati statisticamente significativi (P<0.05) nel caso di Albumina (r = 0.350 HCT<37%), A/G (r = -0.308 Pop Totale, r = -0.328 HCT≥37%), PCR (r = 0.291 Pop Totale), Fibrinogeno ( r = 0.672 Pop Totale), WBC (r = 0.373 Pop Totale, r = 0.350 HCT <37% ), numero di Neutrofili (r = 0.335 Pop Totale), mentre il test di Kruskal-Wallis con marker ha riportato risultati statisticamente significativi (P<0.05) sia nel caso della popolazione totale ( A/G, PCR, WBC e Neutrofili Banda) sia nella popolazione non anemica (A/G, WBC). Nel caso dello studio di correlazione con i marker infiammatori e VES-MC si ha la presenza di risultati statisticamente significativi (P<0.05) nel caso di A/G (r = -0.270 Pop Totale, r = -0.359 HCT≥37%), Fibrinogeno (r = 0.374 Pop Totale, r = 0.632 HCT≥37%), WBC (r = 0.248 Pop Totale) e Neutrofili (r = 0.255 Pop Totale), ed il test di Kruskal-Wallis ha riportato risultati statisticamente significativi (P<0.05) sia nella popolazione totale (A/G, PCR, Fibrinogeno, WBC, Neutrofili e Neutrofili Banda) sia nella popolazione non anemica (A/G, PCR). In entrambe le metodiche (VES-MC e VES-W) i valori della VES fra le cinque categorie sono risultati statisticamente significativa (P<0.05) al test di Kruskal-Wallis sia nella popolazione totale sia nella popolazione non anemica. In entrambe le metodiche è stata osservata una differenza statisticamente significativa tra la media dei ranghi tra i soggetti con patologie immunomediate ed i soggetti che presentano una infiammazione aspecifica o con neoplasie o sani, mentre solo nella metodica VES-W è stata osservata anche una differenza statisticamente significativa della media dei ranghi tra i soggetti con patologie infettive e i soggetti che presentano una infiammazione aspecifica o sani. Gatto Per 5 (8,3%) campioni felini lo strumento ha emesso il segnale ERR; in tutti questi soggetti la VES era risultata alterata, con valori uguali o superiori a 53 mm/h. In nessun caso la VES-W è risultata difasica. Prova sia intra-saggio (CV= 0.04) e inter-saggio (CV= 0.49); Correlazione VES-W e VES-MC (r = 0.857 Pop Totale, r = 0.790 HCT≥30%, r = 0.899 HCT<30%); Coefficiente R^2 tra VES-W e VES-MC (0.734 Pop Totale, 0.623 HCT≥30%, 0.808 HCT<30%); Test Bland-Altman (media aritmetica delle differenza = -0.1, IC 95% = + 21.6 e -21.8 Pop Totale, media aritmetica delle differenza = -0.7, IC 95% = + 20.8 e -22.2 HCT≥30%, media aritmetica delle differenza = -1.5, IC 95% = + 21.4 e -24.3 HCT<30%); test di regressione di Passing & Bablok (assenza differenza statisticamente significativa sia proporzionale sia sistematica dalla VES-W in tutte le popolazioni); L’intervallo di riferimento della VES-MC del cane è risultato da 0 a 11 mm/h; Test Kappa di Cohen (K = 0.826 Pop Totale, K = 0.886 HCT≥30%, K = 0.409 HCT<30%); Sensibilità (0.96 Pop Totale, 1.00 HCT≥30%, 0.91 HCT<30%), Specificità (0.85 Pop Totale, 0.89 HCT≥30%, 0.50 HCT<30%), Valore Predittivo Positivo (0.90 Pop Totale, 0.90 HCT≥30%, 0.91 HCT<30%)) e Negativo (0.94 Pop Totale, 1.00 HCT≥30%, 0.50 HCT<30%). Nell’analisi di correlazione con i marker infiammatori e VES-W si ha la presenza di risultati statisticamente significativi (P<0.05) nel caso del Fibrinogeno (r = 0.453 Pop Totale) ed il test di Kruskal-Wallis ha riportato risultati statisticamente significativi (P<0.05) nella popolazione anemica (WBC e Neutrofili Banda). Nel caso dello studio di correlazione con i marker infiammatori e VES-MC si ha la presenza di risultati statisticamente significativi (P<0.05) nel caso di Fibrinogeno (r = -0.868 HCT<30%), WBC (r = -0.488 HCT<30%) e Neutrofili (r = -0.527 HCT<30%) ed il test di Kruskal-Wallis non ha riportato risultati statisticamente significativi (P