El silenciamiento local controla la respuesta al estrés oxidante y la resistencia multifarmacológica de Candida glabrata

Tesis (Doctorado en Ciencias en Biología Molecular)"En Candida glabrata las sirtuinas Sir2 y Hst1 regulan parcialmente la expresión de una gran cantidad de genes. Dentro de los genes regulados por estas sirtuinas destacan los que codifican para las adhesinas epiteliales y para los transportadores de niacina, que son requeridos para la colonización del hospedero y el crecimiento, respectivamente. Sin embargo, dado que las sirtuinas son susceptibles a inactivarse in vivo, nos preguntamos sí la inhibición de las sirtuinas podría modificar la respuesta de C. glabrata a las condiciones de estrés. En este trabajo encontramos que la deleción de HST1 disminuye la susceptibilidad de C. glabrata al fluconazol y al peróxido de hidrógeno. Nuestros experimentos indican que el factor Pdr1 y el transportador Cdr1 median el fenotipo resistente al fluconazol de la cepa hst1Δ. Por otra parte, el activador Msn4 y la catalasa (Cta1) son necesarios para proveer de resistencia al estrés oxidante. Además, demostramos que el factor de transcripción Sum1 interacciona físicamente con Hst1 y que participa en la regulación de los genes que confieren la resistencia. Finalmente, C. glabrata está relacionada filogenéticamente con la levadura Saccharomyces cerevisiae. Sin embargo, encontramos que la deleción de HST1 sólo modifica la susceptibilidad al fluconazol y al peróxido de hidrógeno en C. glabrata pero no en Saccharomyces cerevisiae, lo que sugiere un control distinto con sirtuinas similares. En conjunto, nuestros resultados sugieren que Hst1 funciona como un regulador de los genes asociados con la resistencia en el patógeno oportunista C. glabrata.""In Candida glabrata, the sirtuins Sir2 and Hst1 control the expression of a wide number of genes including adhesins required for host colonization and niacin transporters needed for growth. Given that these sirtuins can be inactivated during infection, we asked if their inhibition could modify the response of C. glabrata to other stressful conditions. Here, we found that deletion of HST1 decreases susceptibility of C. glabrata to fluconazole and hydrogen peroxide. The transcription factor Pdr1 and the ABC transporter Cdr1 mediated the fluconazole resistance phenotype of the hst1 cells, whereas the transcriptional activator Msn4 and the catalase Cta1 are necessary to provide oxidative stress resistance. We show that the transcription factor Sum1 interacts with Hst1 and participate in the regulation of these genes. Interestingly, even though C. glabrata and Saccharomyces cerevisiae are closely related phylogenetically, deletion of HST1 decreased susceptibility to fluconazole and hydrogen peroxide only in C. glabrata but not in S. cerevisiae, indicating a different transcriptional control by two similar sirtuins. Our findings suggest that Hst1 acts as a regulator of stress resistance associated-genes.