Bioassays on the detection and quantification of genetically modified soybean resistant to glyphosate

O cultivo mundial de soja geneticamente modificada (GM) resistente ao glifosato é crescente e a presença dessas sementes em lotes de sementes convencionais tornou-se um problema para o comércio internacional da soja. Reconhecendo a importância dos novos mercados e dos produtos GM, a Tecnologia de Sementes terá que assegurar a pureza genética dos produtos derivados da biotecnologia através de testes confiáveis, práticos e de baixo custo. Nesse contexto, os objetivos do trabalho foram verificar a eficiência do teste de germinação com herbicida no substrato (bioensaios) na detecção e na quantificação de misturas de cultivares GM em amostras de sementes convencionais. Amostras de sementes convencionais foram preparadas com 0, 1, 3 e 5% de sementes de soja GM e submetidas aos métodos de pré-embebição, substrato umedecido e imersão em herbicida, instaladas em bandejas plásticas contendo 25 sementes, com e sem associação ao kit de detecção de OGM. Na seqüência, amostras contaminadas com 0, 1, 3, 5 e 8% de sementes de soja GM foram semeadas em rolos de papel (25 e 50 sementes/rolo) e bandejas plásticas com 25 sementes seguindo o método de pré-embebição em herbicida. Aos seis dias após a instalação, avaliaram-se comprimento de hipocótilo, comprimento de raiz, número de raízes secundárias e comprimento da maior raiz secundária. O método de pré-embebição é o mais eficiente para a detecção e quantificação da presença de sementes de soja GM, permitindo 100% de acertos na detecção, independentemente da porcentagem de contaminantes nas amostras convencionais de sementes de soja e apresenta exatidão na quantificação da presença de até 3% de sementes de soja GM em amostras convencionais, sendo sua precisão condicionada ao porcentual de mistura presente na amostra.The world cultivation of genetically modified (GM) soybean resistant to glyphosate is increasing and the presence of these seeds in lots of conventional seeds has became a problem for international soybean trade. Recognizing the importance of the new markets and GM products, Seed Technology will have to assure the genetic purity of the biotechnologically derived products through reliable, practical and low cost tests. In this context, the aims of this study were to verify the efficiency of the germination test with herbicide in the substratum (bioassays) in the detection and quantification of GM soybean seed mixtures in conventional seed samples. Samples of conventional seeds were prepared with 0, 1, 3 and 5% GM soybean seeds and submitted to the procedures of pre-soak, soak and immersion in herbicide, installed in plastic trays containing 25 seeds, with and without association to the GMO detection kit. In the sequence, contaminated samples with 0, 1, 3, 5 and 8% GM soybean seeds were installed in paper rolls (25 and 50 seeds/roll) and plastic trays with 25 seeds following the pre-soak procedure in herbicide. Six days after the installation, hypocotyl length, root length, number of secondary roots and the largest secondary root length were evaluated. The pre-soak procedure is the appropriate for the detection and quantification of GM soybean seed presence, permitting 100% successes in the detection, regardless of the contaminant percentage in conventional samples of soybean seeds and it presents accuracy in the quantification of GM soybean seed presence of up to 3% in conventional samples, and its precision is conditioned to the percentual of present mixture in the sample