Rapid detection of Salmonella Enteritidis in food by ELISA assay

O método convencional de detecção de Salmonella spp., além de trabalhoso, consome longo tempo, necessitando-se normalmente de 4 a 5 dias para a confirmação da presença dessa bactéria no alimento. Portanto, o emprego de métodos rápidos e simples é importante para o diagnóstico laboratorial de toxinfecção alimentar e para o controle de qualidade. O objetivo principal deste trabalho foi a padronização de ensaio imunoenzimático-ELISA para detecção de Salmonella Enteritidis em alimentos. O ensaio utilizou anticorpos policlonais para flagelina produzidos em coelho. O anti-soro apresentou pouca reação cruzada com os sorotipos de Salmonella e as diferentes espécies de enterobactérias testadas. A sensibilidade do ensaio foi de 10(4) células/mL, quando testado em cultivo puro. O conjugado peroxidase manteve-se estável durante dois meses a 4ºC e o seu uso deve ser exclusivamente durante este tempo. O ensaio padronizado apresentou simplicidade e rapidez, com sensibilidade de 1 célula/25g de maionese de batata e cenoura, após enriquecimento em água peptonada tamponada durante 24 horas a 37°C, sem necessidade de enriquecimento seletivo.Traditional cultural methods for the detection of Salmonella in foods is a labour-intensive and time-consuming, taking 4 to 5 days for the final results to be known. Therefore, simplified and rapid methods are required for both diagnosis of foodborne diseases and microbiological food quality control. The aim of this study was to develop an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of Salmonella Enteritidis in foods. The assay used a polyclonal detector antibody to flagelin raised in rabbit. The anti-sera obtained showed slight cross-reactions to others Salmonella serotypes and Enterobacteriaceae species tested. The method sensitivity was of 10(4) cells/mL of pure culture. The horseradish peroxidase conjugate was stable up to two months at 4ºC and for this reason it should be used only during this period. The method also showed sensitivity of 1 cell per 25g of potato and carrot salad containing home-made mayonnaise by using only a cultural stage in buffered peptone water incubated for 24 hours at 37°C. In conclusion, the method showed to be practical and reliable to detect Salmonella Enteritidis in foods