Testicular sperm cryopreservation of the teleost 'piau-açu' Leporinus macrocephalus

Avaliaram-se metodologias de criopreservação para o sêmen do piau-açu Leporinus macrocephalus (Teleostei, Anostomidae). O volume de sêmen coletado diretamente dos testículos de seis peixes (446,7±165,1g de peso corporal) foi de 0,4±0,2 ml. Testou-se a toxicidade dos crioprotetores dimetilsulfóxido (DMSO), dimetilacetamida, propilenoglicol, etilenoglicol e metanol nas concentrações de 5%, 10% e 15%. DMSO, dimetilacetamida e propilenoglicol foram os menos tóxicos e, por isso, utilizados na criopreservação do sêmen. Para este teste, o sêmen foi diluído 1:8 (v:v) em soluções de cada crioprotetor(8,9%, concentração final) às quais adicionaram-se gema de ovo de galinha (8,9%, concentração final), glicose (5%) e água destilada (75%). A mistura foi então envasada em palhetas de 5ml de capacidade e imediatamente colocada em botijão de vapor de nitrogênio líquido. A taxa de motilidade espermática pós-descongelamento mais alta (40,8<FONT FACE=Symbol>±</FONT> 13,6 %) foi obtida com sêmen criopreservado em diluente contendo DMSO e ativado em solução de NaHCO3 119mM. A taxa de fertilização, correspondente a 84,3±9,4% do controle, foi obtida com ovócitos de piau-açu fertilizados com sêmen congelado em solução de DMSO (8%, concentração final).Methods for cryopreservation of 'piau-açu' Leporinus macrocephalus (Teleostei, Anostomidae) sperm were evaluated. Sperm collected directly from the testes of six fish (446.7±165.1g of body weight) yielded 0.4±0.2 ml. The toxicity of the cryoprotectants dimethyl sulphoxide (DMSO), dimethyl acetamide, propylene glycol, ethylene glycol and methanol, at concentrations of 5%, 10% and 15%, was tested. DMSO, dimethyl acetamide and propylene glycol were the least toxic and were used to freeze the sperm. Sperm was diluted 1:8 (v:v) in solutions made of 8.9% (final concentration) of one of those crioprotectants to which 8.9% (final concentration) of chicken yolk egg, 5% glucose and 75% distilled water were added. The mixture was then poured into 0.5-ml capacity straws and immediately deepened into a cryogenic shipper containing only liquid nitrogen vapor. The highest frozen/thawed sperm motility rate (40.8<FONT FACE=Symbol>±</FONT> 13.6 %) was obtained with sperm cryopreserved in the DMSO containing diluent and activated in 119 mM NaHCO3. Piau-açu eggs fertilized with sperm previously cryopreserved in solution containing 8% (final concentration) DMSO yielded a rate of fertilization of 84.3 ± 9.4% of the control