Purification of fungal metabolites with toxic effects on Meloidogyne incognita

Objetivando o desenvolvimento de novas metodologias de controle de fitonematóides, este trabalho buscou purificar as substâncias nematicidas produzidas por Cunninghamella elegans, Fusarium sp., Paecilomyces lilacinus eP. variotii. Esses fungos foram cultivados em meio líquido Czapek-Dox durante 15 dias, a 25 ºC, em agitador orbital. Em seguida, filtraram-se as misturas, o que permitiu a obtenção de soluções que foram concentradas sob vácuo e submetidas à purificação direcionada por testes in vitro com Meloidogyne incognita. Observou-se que os filtrados de P. lilacinus e P. variotii perdiam suas atividades nematicidas após a concentração sob vácuo, sugerindo que as substâncias ativas produzidas por esses fungos são consideravelmente voláteis. Para o filtrado de Fusarium sp., observou-se perda total da atividade contra M. incognita após fracionamento em coluna de sílica gel, indicando instabilidade da substância nematicida frente às condições empregadas.Do filtrado de C. elegans isolou-se uma substância que, em solução aquosa na concentração de 250 ppm, imobilizou 94% dos juvenis do segundo estádio de M. incognita expostos a tal solução durante 48 h.In a search for new molecules toxic to plant parasitic nematodes, procedures were set up to purify nematode toxic molecules produced by Cunninghamella elegans, Fusarium sp., Paecilomyces lilacinus and P. variotii. Those fungi were grown in Czapek-Dox liquid medium during 15 days, at 25 ºC, in an orbital shaker. After fungus mycelium removal by filtration, the solutions were concentrated under vacuum and submitted to purification, guided by in vitro assays with Meloidogyne incognita juveniles. As a result, it was observed that P. lilacinus and P.variotii filtrates lost their activity after vacuum concentration, which suggests that the nematocides produced by those fungi are considerably volatile. In the case of Fusarium sp. filtrate, the active substance seems to be unstable, as the activity against M. incognita juveniles completely disappeared after chromatography in a silica gel column. The C. elegans filtrate rendered one isolated substance that immobilized 94% of the M. incognita juveniles exposed during 48 h to an aqueous solution of the substance at 250 ppm