Evaluation of ELISAs for the diagnosis of Actinobacillus pleuropneumoniae infections serotypes 3, 5 and 7 in pigs

Compararam-se dois antígenos no teste de ELISA para o diagnóstico sorológico dos sorotipos 3, 5 e 7 de A. pleuropneumoniae prevalentes no Brasil. Um compunha-se da fase aquosa da extração fenólica de suspensão bacteriana (FAF) e o outro de lipopolissacarídeos de cadeia longa (LPS-CL). Com esses antígenos foram padronizados ELISAs monovalente e polivalente para os sorotipos prevalentes no Brasil. Com os resultados dos testes de um conjunto de amostras de soro de suínos livres de infecção para A. pleuropneumoniae e um conjunto de amostras de soro obtidas de leitões inoculados com os sorotipos citados e que apresentaram soroconversão, determinaram-se as equações discriminantes para os conjuntos de soros e compararam-se os testes quanto à distância generalizada de Mahalanobis, ao coeficiente de determinação, ao teste F, ao coeficiente global, à sensibilidade e à especificidade. Na análise desses parâmetros observou-se que o antígeno FAF foi superior. Com o ELISA PFAF reações positivas não esperadas foram observadas com animais inoculados com os sorotipos heterólogos 2 e 9, não observadas com o PLPS-CL. A sensibilidade dos testes polivalentes ficou entre 91,5 e 95,7% com especificidade similar, indicando que ambos os testes são adequados para triagem sorológica uma vez que detectam os sorotipos 3, 4, 5, 6, 7 e 8.This paper describes the use of two antigens in ELISAs for the diagnosis of A. pleuropneumoniae (serotypes 3, 5 and 7) infections in Brazil. One antigen comprised the aqueous fraction obtained by phenol extraction from bacterial cultures (FAF) and the other was composed of long lipopolysaccharide chains (LPS-CL). Mono and polyvalent ELISA systems were standardized with the prevalent serotypes. Discriminating equations were developed with the ELISA’s results obtained with two sets of serum samples. One set of sera had been collected from piglets free from A. pleuropneumoniae infections (known negative sera) and the other set collected from inoculated piglets after seroconversion (known positive sera). The results were compared using the generalized distance of Mahalanobis, the coefficient of determination, the F test, the global coefficient, the sensitivity, and the specificity. The results obtained with the FAF antigen were superior regarding all the evaluated parameters. However, the FAF-ELISA resulted in unexpected positive reactions with serum samples collected from animals that had been inoculated with heterologous serotypes (2 and 9). The sensitivity and the specificity of both tests ranged from 91.5 to 95.7, indicating that these two antigens are appropriate for use in A. pleuropneumoniae screening tests, as they can detect serotypes 3, 4, 5, 6, 7 and 8