LEAF TISSUE CALLOGENESIS OF APPLE (Malus sp.) ROOTSTOCK CV. M.7 INDUCED BY BAP AND CPPU

O trabalho foi conduzido com o objetivo de estudar a organogênese de macieira (Malus sp), após a obtenção de calo por meio de explantes de folhas do porta-enxerto M.7 multiplicado in vitro. O experimento foi conduzido no Laboratório de Cultura de Tecidos da Embrapa Clima Temperado, utilizando folhas com a superfície abaxial e adaxial em contato com o meio, com ou sem escarificação; associados às citocininas Benzilaminopurina (BAP) e Forchlorfenuron (CPPU) na concentração de 5mM. Utilizou-se o meio básico MS acrescido de sacarose (30 g.L-1 ), mio-inositol (100 mg.L-1) e ágar (6 g.L-1), além do regulador de crescimento Ácido Naftalenoácetico (ANA 0,5mM). Os tratamentos permaneceram por três semanas no escuro sob temperatura ambiente, o que propiciou 100% de formação de calos, sendo em seguida submetidos a fotoperíodo de 16 horas com intensidade luminosa de 20 mE.m-2.s-1 e temperatura de 25 ± 2ºC. Os explantes escarificados proporcionaram maior intensidade de calo do que a utilização de explantes intatos. Explantes escarificados com a superfície abaxial em contato com o meio proporcionaram maior intensidade de calo, independentemente de o meio conter BAP ou CPPU. O uso da escarificação, associado ao CPPU, promoveu uma maior intensidade de calo, independentemente da superfície do disco foliar. A superior regeneração de calos foi alcançada em condição de superfície abaxial do disco foliar associado ao CPPU. Portanto, o uso de explantes escarificados com a superfície abaxial em contato com o meio proporcionou aumento da intensidade de calo. O uso do explante escarificado em meio contendo CPPU proporcionou maior intensidade de calo, independentemente da superfície do disco foliar em contato com o meio.This work was carried out in order to study the apple (Malus sp.) organogenesis after callus formation in M.7 apple rootstock leaf explants multiplied in vitro. The experiment was carried out in the Tissue Culture Laboratory at Embrapa Temperate Climate by using abaxial and adaxial leaves touching the culture media, with or without scarification associated with benzylaminopurine (BAP) and forchlophenuron (CPPU) at 5mM. The MS basal medium used was added to sucrose (30 gL-1), myo-inositol (100mgL-1) and agar (6gL-1). It was also added naphtalene acetic acid (NAA) at 0.5 mM. The treatments remained in darkness for three weeks under room temperature and this led to 100% callus formation and then the material was subjected to 16 hour photoperiod with light intensity of 20 mE.m-2s-1 and temperature of 25 ± 2ºC. The use of scarification associated with CPPU promoted the highest callus intensity independently of the leaf disc surface. Higher callus regeneration was achieved under abaxial surface leaf disks associated with CPPU. So, the use of scarifical explants with the abaxial surface touching the medium led to an increase in callus intensity. The use of scarification and medium containing CPPU, led to the formation of higher callus intensity independently of the leaf disk surface touching the medis