Determinação de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 em milho utilizando purificação com florisil, separação por cromatografia em camada delgada e quantificação visual e densitométrica

A method for determining aflatoxins B1 (AFB1), B2 (AFB2),G1 (AFG1) andG2 (AFG2) in maize with florisil clean up was optimised aiming at one-dimensional thin layer chromatography (TLC) analysis with visual and densitometric quantification. Aflatoxins were extracted with chloroform: water (30:1, v/v), purified through florisil cartridges, separated on TLC plate, detected and quantified by visual and densitometric analysis. The in-house method performance characteristics were determined by using spiked, naturally contaminated maize samples, and certified reference material. The mean recoveries for aflatoxins were 94.2, 81.9, 93.5 and 97.3% in the range of 1.0 to 242 µg/kg for AFB1, 0.3 to 85mg/kg for AFB2, 0.6 to 148mg/kg for AFG1 and 0.6 to 140mg/kg for AFG2, respectively. The correlation values between visual and densitometric analysis for spiked samples were higher than 0.99 for AFB1, AFB2, AFG1 and 0.98 for AFG2. The mean relative standard deviations (RSD) for spiked samples were 16.2, 20.6, 12.8 and 16.9% for AFB1, AFB2, AFG1 and AFG2, respectively. The RSD of the method for naturally contaminated sample (n = 5) was 16.8% for AFB1 and 27.2% for AFB2. The limits of detection of the method (LD) were 0.2, 0.1, 0.1 and 0.1mg/kg and the limits of quantification (LQ) were 1.0, 0.3, 0.6 and 0.6mg/kg for AFB1, AFB2, AFG1 and AFG2, respectively.Um método para determinação de aflatoxinas B1 (AFB1), B2 (AFB2),G1 (AFG1) eG2 (AFG2) em milho utilizando florisil na etapa de purificação foi otimizado com vistas a cromatografia em camada delgada (CCD) unidimensional com quantificação visual e densitométrica. As aflatoxinas foram extraídas com solução de clorofórmio: água (30:1, v/v), purificada em cartuchos de florisil, separada em placas cromatográfica de sílicagel, detectadas e quantificadas por análise visual e densitométrica. As características do método foram determinadas utilizando amostras de milho natural e artificialmente contaminadas e material de referência certificado. Os valores de recuperação média para cada aflatoxina obtidos na faixa de 1,0 a 242 µg/kg para AFB1, 0,3 a 85mg/kg para AFB2, 0,6 a 148 mg/kg para AFG1 e 0,6 a 140mg/kg para AFG2 foram respectivamente 94,2; 81,9 93,5 e 97,3% por análise densitométrica. As correlações obtidas entre análise visual e densitométrica para amostras artificialmente contaminadas foram maiores que 0,99 para AFB1, AFB2, AFG1 e 0,98 para AFG2. Os desvios padrão relativos (DPR) médios, para amostras artificialmente contaminadas foram 16,2; 20,6; 12,8 e 16,9% para AFB1, AFB2, AFG1 e AFG2, respectivamente. O DPR do método, determinado usando amostra naturalmente contaminada (n = 5) foi 16,8% para AFB1 e 27,2% para AFB2. Os limites de detecção do método foram 0,2; 0,1; 0,1 e 0,1mg/kg e os limites de quantificação foram 1,0; 0,3; 0,6 e 0,6mg/kg para AFB1, AFB2, AFG1 e AFG2, respectivamente