Evaluación de la estabilidad de un extracto enzimático, obtenido de Penicillium sp. HC1, con actividad endoxilanasa bajo condiciones de almacenamiento

Las endoxilanasas son enzimas que hidrolizan los enlaces glicosídicos presentes en el xilano que compone la hemicelulosa. La xilosa obtenida, se utiliza en la producción de xilitol, enfoque del proyecto “Producción de xilitol a partir de cascarilla de cebada, residual del proceso cervecero”, llevado a cabo en Laboratorio de Biotecnología Aplicada de la Pontificia Universidad Javeriana. Aquí se utilizan estas enzimas en extracto enzimático, el cual es almacenado en congelación (-20 ºC) o refrigeración (4 ºC) para prolongar su vida útil. Esto ha generado inconvenientes por la pérdida de actividad enzimática. Existen varias metodologías de estabilización de proteínas, una es el uso de aditivos; la sacarosa, el tritón X-100, el glicerol y glicerol con NaCl, se reportan como efectivos en el aumento de la vida útil de dichas moléculas. En este estudio se evaluó la capacidad de los aditivos de mantener la actividad endoxilanasa del extracto enzimático durante dos meses. se produjeron las enzimas a partir del cultivo de Penicillium sp. HC1 con cascarilla de cebada. Después , se realizó una prueba de estabilidad para conocer el pH que permite a la enzima conservar su actividad. El efecto de los aditivos fue evaluado y finalmente se seleccionó el glicerol, dado su buena capacidad estabilizante y su fácil manejo. Finalmente, se realizó la optimización de la concentración del glicerol en presencia de cloruro de calcio y sulfato de manganeso, sales que han mejorado la estabilidad en otros estudios. No obstante, evidenciaron efectos negativos sobre la actividad enzimática, reduciendo la eficiencia del glicerol.Endo Xylanases are enzymes that hydrolyze the glycosidic bonds present in the xylan that make up hemicellulose. The obtained xylose is used in the production of xylitol, focus of the project "Production of xylitol from the barley husk, residual of the brewing process", carried out in the Laboratory of Applied Biotechnology in Pontificia Universidad Javeriana. Here enzymes are used in enzymatic extract, which is stored in freezing (-20 ° C) or refrigeration (4 ° C) to prolong its shelf life. This has generated disadvantages due to the loss of enzymatic activity. There are several protein stabilization methodologies, one of them is the use of additives; sucrose, triton X-100, glycerol and glycerol with NaCl, reported as effective additives. In this study, the capacity of the additives to maintain the endoxylanase activity of the enzymatic extract during two months was evaluated. the enzymes of the Penicillium sp culture were produced. HC1 with barley husk. Then, stability test was conducted to know the pH that allows the enzyme to retain its activity. The effect of the additives on enzyme stability was evaluated and finally the glycerol was selected, given its good stabilizing capacity and easy handling.Finally, concentration optimization was performed in the presence of calcium chloride and manganese sulphate, which have been reported as good stabilizers in other studies. However, they showed negative effects on enzymatic activity, reducing the efficiency of glycerol