Uji toksisitas isolat steroid hasil kromatografi kolom fraksi etil asetat mikrolalga Chlorella sp.

INDONESIA: Steroid merupakan salah satu senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam mikroalga Chlorella sp. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hasil pemisahan senyawa steroid fraksi etil asetat menggunakan kromatografi kolom basah dengan variasi gradien eluen n-heksana dan etil asetat. Sampel kering Chlorella sp. diekstraksi maserasi dengan pelarut metanol. Ekstrak pekat hasil maserasi dihidrolisis dengan HCl 2N dan dipartisi dengan pelarut etil asetat. Senyawa steroid pada pelarut etil asetat dipisahkan dengan kromatografi kolom basah dengan perbandingan eluen n-heksana:etil asetat (95:5; 90:10; 85:15; 80:20; 75:25; 70:30). Monitoring dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Isolat tunggal steroid diuji toksisitasnya menggunakan metode Brine Shrimp Lethality Test dengan parameter nilai LC50. Identifikasi senyawa aktif dilakukan dengan Spektrofotometer UV-Vis dan FTIR. Pemisahan senyawa steroid dengan kromatografi kolom fraksi etil asetat menghasilkan 3 fraksi steroid. Tiga fraksi steroid diuji toksisitasnya menghasilkan nilai LC50 secara berturut-turut sebesar 5,26; 8,03; dan 5,34 ppm. Identifikasi fraksi tunggal steroid menggunakan Spektrofotometer UV-Vis menghasilkan serapan maksimum pada panjang gelombang 276 nm. Sedangkan identifikasi dengan FTIR menunjukkan gugus fungsi –OH, -CH2-, -(CH2)2, C=C tidak terkonjugasi dan -CH(CH3)2. ENGLISH: Steroid is one of the secondary metabolite compounds contained in microalgae Chlorella sp. This research aims to know the results of steroid compounds separation in ethyl acetate fraction using wet column chromatography with variation of eluen gradient. Dry sample of Chlorella sp. was extracted by maceration extraction with methanol solvent. The concentrated extract was hydrolyzed by HCl 2N and partitioned with ethyl acetate solvent. The steroid compound was separated with wet column chromatography by eluent that comparison of n-hexane: ethyl acetate (95:5; 90:10; 85:15; 80:20; 75:25; 70:30). Monitoring is done by Thin Layer Chromatography (TLC). The single steroid fraction was toxicity tested using Brine Shrimp Lethality Test with LC50 values of parameters. The identification of active compounds is carried out by UV-Vis Spectrophotometer and FTIR. Separation of steroids compounds by column chromatography in ethyl acetate fraction obtained 3 fraction of steroid. The result of toxicity test by three isolates result LC50 values respectively was 5,26; 8,03; and 5,34 ppm. Identification of steroids isolate fraction using spectrophotometer UV-Vis showed maximum wavelength in 276 nm. Based on FTIR analysis of steroids isolate fraction showing that the compound have functional groups of –OH, -CH2-, -(CH2)2, C=C not conjugated, and -CH(CH3)2