Efeito do led vermelho sobre o número de células viáveis, morfologia e modulação de espécies reativas de oxigênio (eros) por células pulpares de dentes decíduos

FAPEMIG - Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas GeraisTrabalho de Conclusão de Curso (Graduação)Objetivo: avaliar o efeito de diferentes parâmetros do LED vermelho sobre o número de células viáveis, metabolismo celular, morfologia e modulação de espécies reativas de oxigênio (EROs) e óxido nítrico (ON) por células pulpares de dentes decíduos. Material e método: células pulpares de dentes decíduos foram obtidas de 2 dentes hígidos esfoliados e cultivadas em placas de acrílico de 24 compartimentos (1x105células/compartimento) utilizando DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino (SFB). Após 24 horas, foi realizada a indução da produção de mediadores inflamatórios pela aplicação de lipopolissacarídeo (LPS) de E.Coli, na concentração de 10µg/ml de meio de cultura. Logo após a aplicação do LPS as células foram irradiadas uma única vez (630 nm, 40 mW/cm2 e 80 mW/cm2) nas doses de 4 J/cm2, 15 J/cm2 e 30 J/cm2. Foram realizadas as análises de viabilidade celular (MTT), número de células viáveis (azul de Tripano), morfologia celular (MEV) bem como a quantificação de ON (reagente de Griess) e de espécies reativas de oxigênio (EROs) utilizando uma sonda de fluorescência (DCFH-DA). Todas as avaliações foram realizadas 24 horas após a irradiação. Os testes estatísticos foram Kruskall-Wallis e Mann-Whitney, com inferências estatísticas baseadas no nível de significância de 5%. Resultado: Na presença de LPS, as doses de 15 e 30 J/cm2 (40 mW/cm²) e 4 e 15 J/cm² (80 mW/cm²) apresentaram maior viabilidade celular quando comparado ao grupo controle (não irradiado) (p 0,05). Pôde-se observar células pulpares de aspecto normal, com formato fusiforme, recobrindo a lamínula de vidro na MEV. Na presença de LPS, os parâmetros irradiados com 40 mW/cm2 apresentaram os menores valores de ON, com diferença estatisticamente significante entre os parâmetros de irradiação e o grupo controle (com LPS) (p 0,05). As imagens geradas após a utilização da sonda para detecção de EROs confirmam os achados quantitativos. Conclusão: As densidades de energia de 15 e 30 J/cm² e irradiândia de 80 mW/cm² foram os parâmetros de irradiação mais efetivos para modular o estresse oxidativo nas células pulpares de dentes decíduos, sem causar danos ao metabolismo e morfologia celula