Alterazione del segnale glutammatergico nell'isola pancreatica in condizioni iperglicemiche

Il diabete di tipo 2 \ue8 caratterizzato dalla progressiva disfunzione delle cellule beta. Abbiamo recentemente dimostrato che il trasportatore del glutammato GLT1, selettivamente espresso in cellule beta, regolando la concentrazione del glutammato nell\u2019isola, esercita un ruolo chiave nel controllo della funzionalit\ue0 dell\u2019isola e dell\u2019integrit\ue0 beta pancreatica. Scopo del lavoro \ue8 stato quello di verificare l\u2019effetto di cambiamenti acuti e cronici dei livelli di glucosio sulla espressione di GLT1, utilizzando come modello sperimentale isole umane isolate e linee cellulari beta. L\u2019esposizione acuta (30 min-2hr) e cronica (3 giorni) delle cellule beta clonali e umane a elevate concentrazioni di glucosio (15 mM) causa la rilocalizzazione del trasportatore in compartimenti intracellulari di endocitosi e la conseguente inibizione dell\u2019attivit\ue0 di trasporto, misurata come trasporto di [3H]-glutammato (inibizione del 30% rispetto a 15 mM glucosio; p<0.05;, n=3 preparazioni). Una simile rilocalizzazione \ue8 stata rilevata in tessuto pancreatico di 5 su 8 soggetti con diabete di tipo 2 (DMT2 et\ue0: 67\ub18 anni; M/F:5/3), ma in nessuno dei 5 controlli non-diabetici (et\ue0: 69\ub17 anni; M/F:3/2). Analisi di western blot condotte su isole umane incubate per 3 giorni con 15 mM glucosio, evidenziano una down regolazione della via di trasduzione del segnale mediata da PI3K/P-Akt (-35% dell\u2019espressione di P-Akt; p<0.05%). In accordo con questa possibilit\ue0, l\u2019inibizione di PI3K con LY294 determina la rilocalizzazione del trasportatore in compartimenti intracellulari e l\u2019inibizione della sua attivit\ue0 del 75% (p<0.001; n=2 preparazioni). Trattamenti cronici (fino a 3 giorni) di isole isolate umane con sostanze che upregolano l\u2019espressione del trasportatore (ceftriaxone) prevengono l\u2019apoptosi indotta da 15 mM glucosio (80%; p