Activación de Src quinasa: implicaciones predictivas y pronósticas en pacientes con cáncer de colon.

El cáncer colorrectal (CCR) es una enfermedad neoplásica molecularmente heterogénea que comprende un espectro de tumores de una gran variabilidad en cuanto a su evolución natural y susceptibilidad a distintos fármacos antineoplásicos. La identificación de nuevos biomarcadores pronósticos y/o predictivos en este contexto puede aportar información fundamental sobre los mecanismos moleculares que determinan y regulan el comportamiento de la enfermedad, y facilitar nuevas herramientas de gran utilidad clínica para subclasificar de manera más precisa a los pacientes o descubrir nuevas dianas de tratamiento. Src pertenece a una familia de receptores tirosina-quinasa citoplasmáticos que actúa como regulador de diversos procesos relacionados con la carcinogénesis. La activación de Src se asocia a un fenotipo tumoral más agresivo y puede mediar la resistencia a determinados agentes quimioterápicos, resistencia que puede potencialmente revertirse farmacológicamente con inhibidores específicos de Src. El objetivo de este estudio ha sido evaluar la expresión de pSrc (Src activado) en pacientes con CCR y evaluar su papel como factor pronóstico de la evolución natural de la enfermedad y como factor predictivo de resistencia al tratamiento con quimioterapia. Con este fin se ha estudiado la expresión tumoral de pSrc en dos cohortes de pacientes: una primera cohorte de 487 pacientes con CCR estadío II-III resecado, seguido o no de quimioterapia (QT) adyuvante, y una segunda cohorte de 154 pacientes con CCR metastásico tratados en primera línea con QT basada en dobletes de fluoropirimidinas (FP) con oxaliplatino o irinotecán (CPT11). La evaluación de pSrc se realizó mediante técnicas de inmunohistoquímica (IHQ) en matrices de tejido tumoral estableciéndose 4 categorías según el nivel de expresión de pSrc: 0 (ausencia de expresión), +1 (expresión leve), +2 (expresión moderada) y +3 (alta expresión). En pacientes con CCR estadío II-III se observó que la alta expresión de pSrc (+3) se asociaba de forma significativa con un peor pronóstico en términos de supervivencia libre de enfermedad (SLE) a 5 años (39.2% en pacientes con expresión de pSrc alta (+3) versus (vs) 63.3% en pacientes con expresión de pSrc baja (0-2), HR=0.56; p=0.005) y supervivencia global (SG) a 5 años (57.5% vs 74.2% en pacientes con expresión de pSrc alta (+3) vs baja (0-2), respectivamente, HR=0.55; p=0.02). Además, el análisis multivariante confirmó la sobreexpresión de pSrc como factor de mal pronóstico en CCR localizado independientemente de otros factores clínico-patológicos de conocida relevancia pronóstica para este tumor. No obstante, no se observó una clara asociación entre la expresión de pSrc y la resistencia a quimioterapia, ya que la expresión de pSrc tuvo impacto negativo en la supervivencia independientemente del tratamiento adyuvante recibido. En la cohorte de pacientes con CCR avanzado también se observó una peor evolución clínica en tumores con expresión de pSrc (1-3) en comparación con tumores con ausencia de expresión (0), tanto en términos de supervivencia libre de progresión (SLP) (tasa de SLP a 12 meses de 65.3% vs 73.8%, respectivamente, p=0.76), como de SG (tasa de SG a 3 años de 51.6% vs 60.9%, respectivamente, p=0.93), si bien las diferencias observadas no alcanzaron la significación estadística. Igualmente, se observó cierta tendencia a una peor respuesta a la QT en tumores pSrc positivo comparado con aquellos con expresión de pSrc ausente (tasa de respuesta objetiva (TRO) de 43.5% vs 49.3%, respectivamente, p=0.52), pero esta diferencia tampoco fue estadísticamente significativa. En resumen, los resultados de nuestro estudio demuestran la relevancia de la activación de Src en la biología del CCR, particularmente en estadíos localizados, lo cual es de gran importancia no solo porque contribuye a una mejor estratificación pronóstica de los pacientes para las decisiones clínicas, sino también porque Src es una enzima cuya actividad es potencialmente manipulable con inhibidores específicos de Src, siendo por lo tanto un biomarcador de gran potencial terapéutico.Colorectal cancer (CRC) is a molecularly heterogeneous neoplasic disease that comprises a spectrum of tumors with a great variability in their natural history and susceptibility to different antineoplastic drugs. The identification of new prognostic and/or predictive biomarkers in this context can provide essential information on the molecular mechanisms that regulate the disease and provide new clinical tools to optimize prognostic stratification of patients or discover new therapeutic targets. Src belongs to a family of cytoplasmic non– receptor tyrosine kinases that play a key role in the regulation of different cellular processes related to carcinogenesis. Src activation has been associated with a more aggressive neoplastic phenotype and correlates with resistance to certain chemotherapeutic drugs, and preclinical studies have shown that this resistance can be reversed by pharmacological inhibition with specific inhibitors of Src. The aim of our study was to evaluate pSrc expression in a large cohort of patients with CRC and to assess its potential value as a prognostic and/or predictive biomarker in this context. With this purpose, pSrc expression was assessed in two cohorts of patients: a first cohort of 487 patients with surgically resected stage II-III colon cancer, treated or not with adjuvant chemotherapy, and a second cohort of 154 patients with metastatic CRC treated in first line with chemotherapy regimens containing fluoropyrimidines and oxaliplatin or irinotecan. pSrc expression was assessed in paraffin-embedded tumor samples by immunohistochemistry, and cases were classified by staining intensity in 4 categories:: no staining (0), weak (+1), moderate (+2), and intense (+3) staining. In the first cohort, high pSrc expression (+3) was significantly associated with decreased 5- year disease-free survival (39.2% vs 63.3% for patients with high (+3) vs low (0-2) pSrc expression, HR= 0.56; P = 0.005) and overall survival (OS) (57.5% vs 74.2%, HR= 0.55; P = 0.02). Multivariate analysis confirmed pSrc expression as a significant prognostic factor both for disease-free and overall survival, independent of other clinicopathological factors of known prognostic relevance for this tumor. However, no clear association was observed between pSrc expression and resistance to chemotherapy, as pSrc expression was shown to have a negative impact on survival regardless of the adjuvant treatment received. In the metastatic CRC cohort, positive pSrc expression (1-3) was associated with worse outcomes compared to the absence of expression (0), both in terms of progression-free survival (PFS rate at 12 months was 65.3% vs 73.8%, respectively, p=0.76) and of overall survival (OS rate at 3 years was 51.6% vs 60.9%, respectively, p=0.93). Nevertheless, these differences did not reach statistical significance. Moreover, there was also a non-significant trend towards worse response rates to chemotherapy in positive vs negative pSrc-expression tumors (43.5% vs 49.3%, respectively, p=0.52). In summary, the results of our study illustrate the relevance of Src activation in colon cancer biology, particularly in early stages of disease, and this is of great importance not only as it improves the prognostic stratification of patients to help in clinical decisions, but also because if opens new avenues for potential pharmacologic manipulation that may eventually improve patients' outcomes