Adaptación de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la identificación de especies Armillaria en Galicia

En este trabajo se presentan los resultados obtenidos al aplicar distintos métodos, basados en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y el análisis de fragmentos de restricción (RFLP), para la identificación de especies de Armillaria en muestras sintomáticas de diferentes cultivos en Galicia. De las metodologías ensayadas para la obtención de ADNr amplificado, la mejor, desde el punto de vista económico y de eficacia, consistió en la extracción del ADNr con un kit comercial, seguido por la amplificación del ADN extraido usando las bolitas "Ready to Go PCR beads". El ADNr amplificado se cortó con las enzimas AluI, NdeI y BsmI, consiguiendose, en un día, la determinación de las especies de Armillaria a partir de diferentes estructuras del hongo: esporas, micelio sobre planta, micelio en cultivo y rizomorfos. En las muestras analizadas, se confirmó la presencia de tres especies, dos de caracter altamente patógeno: Armillaria melea y Armillaria ostoyae, y otra con carácter saprófito o parásito de debilidad: Armillaria gallic