Investigation of the Relationship between Actin Cytoskeleton and Golgi

Note:The main objective of the study is to investigate anterograde and retrograde trafficking of proteins between endoplasmic reticulum and the Golgi apparatus and potential role of actin in this process. The ER-Golgi velocity of cargo transport was measured by using VSVG-GFP. Golgi-ER transport was pharmacologically induced and studied in BFA treated Galtase-GFP or P58-GFP expressing cells. A light microscopic approach combining live cell imaging and immunofluorescent in the fixed cells was used. Galtase-GFP was redistributed to the ER over a timescale of 5 minutes, and was visible in tubular structures extended from the Golgi apparatus. P58, by contrast, appeared in punctate structures, often in a linear "prayer-bead" arrangement that left the Golgi apparatus after BFA treatment. […]Le objectif principal de cette étude a été d'investiguer le transport protéique antérograde et rétrograde entre le réticulum endoplasmique (RE) et l'appareil de Golgi ainsi que le rôle potentiel du cytosquelette d'actine dans ce processus. Pour ce faire, la vitesse du transport de cargo RE-Golgi a été mesurée à l'aide de la protéine virale recombinante VSVG-GFP. Le transport Golgi-RE quant a lui a été étudié et induit pharmacologiquement clans des cellules exprimant la Galtase-GFP ou la P58-GFP et ayant été traitées avec la Brefeldine A (BFA). Une stratégie de microscopic photonique utilisant à la fois l'imagerie de cellules vivantes et l'immunofluorescence sur cellules fixées a été employée pour les fins de ces expériences. La Galtase-GFP se redistribue au RE sur une période de 5 minutes et se retrouve clans des structures tubulaires provenant du Golgi. P58 par contre est présente dans des structures ponctuelles, souvent arrangées linéairement en « billes de chapelet », s'échappant du Golgi consécutivement a l'ajout de BFA. […