Multidrogrezisztencia-vizsgálatok krónikus lymphoid leukaemiában = Multidrug resistance in chronic lymphocytic leukemia

Az utóbbi években krónikus lymphoid leukaemiában új prognosztikai faktorok vizsgálata került a figyelem középpontjába. A citogenetikai eltérések, az immunglobulin-nehézlánc génmutációs státusza, a CD38- és ZAP70-expresszió mind a közelmúltban megismert prognosztikus faktorok, de kevés az adat a multidrog-rezisztencia jelentőségéről. Célok: A tanulmány célja genetikai, expressziós és funkcionális szinten jellemezni 82 krónikus lymphoid leukaemiában szenvedő beteg multidrog-rezisztenciájának sajátosságait, és vizsgálni azok összefüggését a betegek túlélésével és a kezelésre adott válasszal. Módszerek: a szerzők 66 betegnél vizsgálták az MDR-1 gén ben – Light Cycler Real Time PCR segítségével meghatározott – „Single Nucleotid Polymorphism” sajátosságot, amely irodalmi adatok szerint a P-glikoprotein expresszióját befolyásolja. Összesen 82 betegnél áramlási citometria során anti-P-glikoprotein monoklonális antitest segítségével a P-glikoprotein- expresszió t, az ún. calcein-verapamil teszttel pedig a multidrog-rezisztencia funkcióját vizsgálták. A kezelésre adott választ 35 betegnél vizsgálták, a statisztikai elemzésnél Fischer-tesztet alkalmazva. A túlélési analízist a teljes beteganyagon elvégezték ( n = 82, Log-rank-teszt). Eredmények: Az irodalmi adatokkal ellentétben a szerzők nem találtak korrelációt a vizsgált három multidrogrezisztencia-teszt között. A kezelésre adott választ vizsgálva 35 kezelt betegből 13 nonrespondernek, 22 pedig respondernek bizonyult. A P-glikoprotein-pozitív fenotípusú esetek ( n = 9) 89%-ban klinikailag nonrespondernek bizonyultak (9 P-glikoprotein-pozitív krónikus lymphoid leukaemiás beteg közül 8 nonresponder volt), a P-glikoprotein-negatív esetek ( n = 26) pedig 80%-ban jó terápiás választ mutattak (26 P-glikoprotein-negatív beteg közül 21 responder) ( p < 0,001). Az átlagos várható túlélésben is jelentős, bár nem szignifikáns ( p = 0,106) különbséget észleltek (84 vs 203 hónap). Következtetések: A vizsgált három laboratóriumi paraméter közül a P-glikoprotein sejtfelszíni jelenléte a leginkább releváns adat krónikus lymphoid leukaemiában a kemorezisztencia előjelzésére és a túléléssel kapcsolatban is prognosztikai faktorként értékelhető. | Introduction: New prognostic factors discovered in chronic lymphocytic leukemia have recently got into the center of clinical interest. While the predictive value of cytogenetical abnormalities, immunglobulin heavy chain gene mutation status, CD38 and ZAP70 expression is already well known, the significance of multidrog resistance in chronic lymphocytic leukemia is not well characterized. Aims: The goal of this study was to characterize the multidrug resistance features in 82 patients with chronic lymphocytic leukemia at the genetical, expression- and functional level and to compare it with the patient’s clinical behavior (survival and response to therapy). Methods: Light Cycler Real Time PCR based „Single Nucleotide Polymorphism” analysis of the MDR1 gene, as a biological predictor of the expression level of P-glycoprotein was tested in 66 patients with chronic lymphocytic leukemia. P-glycoprotein expression and MDR-function was detected in 82 cases by flow cytometry (by use of anti-P-glycoprotein monoclonal antibody and calcein-verapamil functional test). Response to therapy was analyzed by statistical Fisher-test in the treated 35 patients. The survival analysis (Log-rank test) was performed on the whole population ( n = 82). Results: No significant correlation was found between the three levels of multidrug resistance (genetics, phenotype, function) in our patients with chronic lymphocytic leukemia. P-glycoprotein positive cases ( n = 9) were predominantly non-responders (8/9, 89%). There must be, however, other mechanisms causing non-response (total non-responders: 13/35 treated cases). Most of P-glycoprotein negative CLL patients ( n = 26) responded well (21/26, 80%) to chemotherapy (responders: 22/35 treated CLL) ( p < 0,001). The tendency was the same in the average expected survival rate between P-glycoprotein positive and negative patients (84 vs 203 mounths) but the difference was not significant ( p = 0,106). Conclusions: This study proved the clinical prognostic significance of P-glycoprotein expression of leukaemic cells predicting the chemotherapy response and partially estimating the general survival of patients suffering from chronic lymphocytic leukemia