Identificación de epítopos de proteínas del virus dengue utilizando una biblioteca de péptidos presentados en fagos filamentoso

La tecnología de exposición de péptidos en fagos filamentosos es una alternativa para identificar epítopos de las proteínas del virus dengue de potencial uso en el desarrollo de vacunas y ensayos diagnósticos. En el presente trabajo, el empleo de esta tecnología permitió identificar cuatro mimotopos que simulan epítopos de este virus, basado en el reconocimiento por anticuerpos contra el serotipo 3 del virus, presentes en sueros humanos. Uno de dichos mimotopos mostró una secuencia aminoacídica similar a una región de la proteína no estructural NS3, altamente conservada entre los cuatro serotipos del virus, y una de las más potentes inductoras de la respuesta de linfocitos T. Los tres mimotopos restantes mostraron similitud aminoacídica con la proteína no estructural NS4B. Se demostró que el mimotopo de NS4B en sus dos variantes peptídicas, acoplado a la albúmina bovina sérica así como en forma de un sistema de péptidos de múltiples antígenos, detectó anticuerpos a tres de los cuatro serotipos. Los mayores niveles de detección se encontraron al serotipo 3 del virus, en sueros de pacientes con una infección secundaria, lo cual sugiere la potencialidad de los mismos para aplicarse como herramienta diagnóstica para la tipificación viral. El sistema de péptidos de múltiples antígenos indujo en ratones una respuesta de anticuerpos específica, lo que corrobora el papel de la proteína NS4B en la respuesta inmune del hospedero durante la infección. Se confirmó también que la secuencia aminoacídica correspondiente al mimotopo de NS4B, mostró “in sílico” elevada probabilidad de presentarse como epítopo de células T por una proporción de individuos de la población cubana y de otras zonas geográficas, todo lo cual apoya la inclusión del mismo en el diseño de futuras vacunas de subunidades