Polimorfismos da região promotora (5'URR) do gene HLA-G em pacientes com lesões de colo do útero

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2017.O câncer de colo do útero é o terceiro câncer mais comum em mulheres em todo o mundo, sendo assim, uma das principais causas de morbidade e mortalidade em países em desenvolvimento. O principal fator de risco é a infecção persistente com certos tipos oncogênicos de papilomavírus humano (HPV), que podem induzir neoplasias intraepiteliais cervicais (NIC) graus 1, 2 e 3. Não tratadas, essas lesões podem progredir para o câncer de colo do útero. O desenvolvimento de tumores depende de diferentes estratégias de escape do reconhecimento por células imunes. O gene HLA-G expressa moléculas de mesmo nome, com papel de regulação da imuno tolerância, envolvidas na inibição de respostas imunes. Sua expressão, em condições patológicas, pode permitir o desenvolvimento da infecção do HPV no trato cervical feminino e desenvolvimento de células tumorais. É proposto que variações de nucleotídeo único (SNVs) presente na região promotora 5' (5'URR) do gene podem influenciar os níveis de HLA-G, modificando a afinidade com fatores de transcrição. O objetivo deste estudo foi verificar a influência de vinte e um SNVs, localizados na 5'URR do HLA-G sobre a suscetibilidade à lesões de colo do útero e fatores de risco em pacientes. As amostras do estudo foram compostas por 83 pacientes e 83 mulheres saudáveis. A genotipagem foi realizada por sequenciamentoe 14 SNVs (-725G/C/T G e CC; -689A/G G, GG e GA; -646A/G G, GG e GA; -539A/G A e AA; -509C/G G, GG e CG; -486A/C CA; -483A/G A e AA; -477C/G G e GG; -443G/A A e AA; -400G/A A e AA; -399G/A A e AA; -391G/A A e AA; -369C/A A e AA; -284G/A A e AA) foram associados ao risco de desenvolvimento de câncer. Além disso, os resultados indicam uma associação entre o gene HLA-G (alelo G nos sítios -539A/G e -477 C/G ) com diferentes graus da lesão (NIC e câncer de colo do útero) e presença/ausência de infecção por HPV. Concluindo, este estudo sugere um possível envolvimento de polimorfismos da 5?URR com risco de infecção por HPV, associada ao desenvolvimento de câncer do colo de útero.Abstract : Cervical cancer is the third most common cancer in women worldwide and one of the main causes of morbidity and mortality in developing countries. The major risk factor is related with the persistent infection with certain types of oncogenic human papillomavirus (HPV), that can induce cervical intraepithelial neoplasias (CIN) grades 1, 2 and 3. If untreated, these lesions may progress to cervical cancer. The tumor development depends on different strategies to escape recognition by immune cells. In this context, the HLA-G molecule has immune tolerance properties, including the inhibition of immune responses. HLA-G expression, under pathological conditions, may allow the development of HPV infection in the female cervical tract and allow the development of tumor cells. It is proposed that, single nucleotide variations (SNVs) present in the 5 'promoter region (5'URR) can influence HLA-G levels modifying the affinity for transcription factors. The aim of this study was to explore the possible association between twenty-one SNVs located on the 5?URR HLA-G, the susceptibility to cervical lesions and patients risk factors. The samples were composed by 83 patients and 83 healthy women. SNVs identification was performed by capillary sequencing and 14 SNVs (-725 G/C/T, -689 A/G, -646 A/G, -539 A/G, -509 C/G, -486 A/C, -483 A/G, -477 C/G, -443 G/A, -400 G/A, -399 G/A, -391 G/A, -369 C/A e -284 G/A) were associated as risk for cervical cancer developing. In addition, it was observed an association between two SNVs (allele G in -539A/G and -477C/G) with different degrees of lesion (CIN and cervical cancer) and the presence or absence of HPV infection. Concluding, this study suggests a possible involvement of HLA-G 5?URR SNVs with HPV infection risk and cervical cancer