3-Amino-1,2,4-Triazol vér kataláz enzim gátlás vizsgálata

A kataláz enzim a humán szervezetben a hidrogén-peroxid szabályozásának a fő enzime. Az akatalazémia öröklődő vér kataláz hiány. Az akatalazémia a homozigóta forma, melyben jellemzően a vér kataláz aktivitása kevesebb, mint 8%-a a referens vér kataláz aktivitásnak. A heterozigóta formát hypokatalazémiának nevezzük, melyben a vér kataláz aktivitása a referens vér kataláz aktivitás 50%-a. A kísérletes munkám során a célom a 3-amino-1,2,4-triazol oldattal történő kataláz enzim gátlási módszer kidolgozása irodalmi adatok alapján, valamint a teljes gátlás elérése érdekében a 3-amino-1,2,4-triazol koncentráció beállítása, a gátlási hőmérséklet optimalizálása, szükséges anyagok, paraméterek beállítása, egy mások által is alkalmazható protokoll kidolgozása. További célom, az általam kidolgozott módszert alkalmazva ismert akatalazémiás és hypokatalazémiás minták gátlási vizsgálata és a kapott mérési adatok értékelése. A kísérletes munkám során a kataláz aktivitás méréseket K3-EDTA-val alvadásgátolt vérből végeztem. Olyan vérmintákat használtam fel, melyek vörösvértest száma és hemoglobin koncentrációja a referens tartományon belüli volt. A kataláz aktivitás méréseket spektrofotometriás eljárással, szubsztrát bontási technikával végeztem. Az eljárás során a feleslegben adott hidrogén-peroxidot egy percig reagáltattam az enzimmel, ammónium-molibdenátot alkalmazva sárga színű komplex keletkezik. Az abszorbanciák mérését 405 nm-en végeztem. A kísérletes munkám során 5 akatalazémiás és 8 hypokatalazémiás mintán alkalmaztam a kataláz enzim gátláshoz kidolgozott módszert. Minden esetben a kataláz enzim teljes mértékű gátlását detektáltam. Az akatalazémiás minták kataláz aktivitása a gátlás után a kezdeti aktivitás 0% - 9,93%-ára csökkent, míg a hypokatalazémiás minták kataláz aktivitása a kezdeti aktivitás 3,09% - 18,08%-ára csökkent.BSc/BAorvosi laboratóriumi és képalkotó diagnosztikai analitikusmagyarOrvosdiagnosztikai laboratóriumi analitikanappal