Estudio de nuevos marcadores de infertilidad masculina

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología. Fecha de lectura: 10-05-2018La infertilidad, definida por la OMS como la incapacidad de lograr un embarazo clínico después de 12 meses o más de relaciones sexuales no protegidas, es un problema que en países desarrollados afecta a un 14% de las parejas. Hasta ahora el abordaje del varón infértil se ha centrado fundamentalmente en el análisis del seminograma (concentración espermática, motilidad y morfología). Sin embargo, cada vez más estudios apuntan a la necesidad de actualizar este abordaje incluyendo nuevos biomarcadores moleculares de infertilidad masculina más específicos y más adecuados a la evolución actual tanto de la infertilidad masculina propiamente dicha como de las técnicas de reproducción asistida. En esta tesis se ha partido de dos aspectos de la infertilidad masculina que recientemente han suscitado gran interés entre la comunidad científica especializada en el campo, el estrés oxidativo como fuente de daño en el espermatozoide y la presencia de prostasomas en el eyaculado, estableciéndose como objetivo generar la búsqueda de biomarcadores que permitan relacionar estos dos aspectos con la infertilidad masculina. En relación con el estrés oxidativo como fuente de daño en el espermatozoide, se ha llevado a cabo una búsqueda de marcadores a nivel genético, analizando la relación existente entre una serie de polimorfismos localizados en genes codificantes para enzimas antioxidantes (SOD2, CAT, GPX1, GSTs) y de reparación del daño en el DNA (OGG1, XRCC1), y la presencia de infertilidad. Para el SNP CAT C-262T el genotipo CC se relacionó con un aumento de la probabilidad de presentar infertilidad (OR = 2.262, IC 95% = 1.369 - 3.733; P = 0.001) mientras que el genotipo CT se asoció con un efecto protector (OR = 0.401; IC 95% = 0.241 - 0.667; P = 0.001). Para el polimorfismo XRCC1 Arg399Gln el genotipo Arg/Arg se asoció con un aumento de la probabilidad de presentar infertilidad (OR = 2.223, IC 95%=1,296-3.813; P=0.003),y el heterocigoto Arg/Gln muestra un efecto protector frente a la infertilidad (OR =0.555; IC 95%=0.337-0.912; P=0.019) Por otra parte, también se ha realizado un análisis comparativo, cualitativo y cuantitativo, del contenido proteómico de prostasomas presentes en el plasma seminal de varones normozoospermicos y no normozoospermicos, determinándose que estos últimos presentan patrones de subexpresión proteica para 54 proteínas con funciones relevantes en los procesos reproductivos, incluyéndo 7 de proteínas que forman parte de las rutas de producción de energía en el espermatozoide (LDHC, GLUT3, HK1, APRT, AK1, PNP y CMPK1). Además, se ha realizado un análisis preliminar comparativo de la carga de DNA de los prostasomas, determinándose que los prostasomas aislados a partir de eyaculados no normozoospermicos presentan una cobertura de DNA mitocondrial un 10% inferior a los normozoospérmicos. Los polimorfismos genéticos tipo SNP presentes en genes como la catalasa y el gen XRCC1, junto con las variaciones en los niveles de algunas proteínas presentes en los prostasomas pueden tener una correlación relevante con la fertilidad masculina y, por lo tanto, podrían ser de gran utilidad como biomarcadores del estado de fertilida