Estabelecimento do modelo murino para a modulação de toxicidade do Benzonidazol durante a terapêutica da Doença de Chagas (Trypanosoma cruzi)

Após um século da sua descoberta, a doença de Chagas causada por protozoário Trypanosoma cruzi representa uma das principais doenças tropicais negligenciadas em vários países da América Latina. O Benzonidazol (BNZ) é o fármaco de primeira escolha para o tratamento da doença, contudo apresenta uma eficácia terapêutica variável na fase crónica da doença. Além disso, em muitas situações os pacientes apresentam efeitos adversos graves, que conduzem ao abandono do tratamento. A eficácia antiparasitária do fármaco pode estar diretamente relacionada com à heterogeneidade de T. cruzi, bem como as propriedades farmacocinéticas desfavoráveis, a baixa solubilidade aquosa e imponderável biodisponibilidade do BNZ. Deste modo, este estudo teve como objetivos principais a determinação da toxicidade aguda do BNZ e das nanoformulações do BNZ em modelo murino através do ensaio da determinação da dose máxima tolerada e quantificação dos biomarcadores da função hepática. Paralelamente, realizaram-se o estudo da suscetibilidade in vitro ao BNZ das estirpes de T. cruzi (Y, Bolívia e QMM5) e o estudo da infeciosidade das mesmas estirpes em modelo murino. Os resultados indicaram que os excipientes e as nanoformulações do BNZ apresentaram um bom perfil de tolerância deste modo podem ser uma alternativa para a terapêutica da doença de Chagas. As três estirpes apresentaram suscetibilidade in vitro ao BNZ e a análise dos soros dos murganhos Mus musculus (Balb/c) inoculados com as estirpes do parasita demostram a presença anticorpos anti- T. cruzi. A resposta humoral foi poliisotípica, com predomínio da produção dos anticorpos IgG e IgM anti-T. cruzi bem como algumas subclasses de anticorpo, a IgG1 e IgG2a e IG3. A produção do NO e da citocina IL-4 aumentou durante a fase inicial da infeção com diminuição na fase mais avançada da infeção, setenta dias pós infeção sendo sugestivo da ação imunomodulatória na infeção por T. cruzi. Estes resultados reforçam a compreensão da fisiopatologia da doença de chagas e permitem auxiliar futuramente na compreensão da eficácia das nanoformulações do BNZ durante o tratamento da doença de chagas no modelo murino.After a century of its discovery, Chagas disease caused by protozoan Trypanosoma cruzi is one of the major neglected tropical diseases in several Latin American countries. The benznidazole (BNZ) is the drug of choice for the treatment of disease, but has a variable therapeutic efficacy in chronic phase of the disease. Furthermore, in many situations the patients have serious side effects that leading to abandonment of the treatment. The antiparasitic drug efficacy can be directly related to the heterogeneity of T. cruzi population in addition with the unfavorable pharmacokinetic properties of BNZ, the low aqueous solubility and bioavailability of imponderable. Thus, this study had as main objectives the determination of the acute toxicity of BNZ and nanoformulations of BNZ in mice through the test for determining the maximum dose tolerated and quantification of iomarkers of liver function. Meanwhile, there have been the study of in vitro susceptibility to BNZ strains of T. cruzi (Y, Bolivia and QMM5) and study the infectivity of the same strains in mice. The results indicate that excipients and nanoformulations of BNZ showed a good tolerability profile and can be an alternative for the treatment of Chagas disease. The three strains showed susceptibility to the BNZ in vitro and analysis of the sera of Mus musculus (Balb/c) inoculated with strains of the parasite demonstrate the presence of anti- T. cruzi. The humoral response was poliisotípica, predominantly the production of IgG and IgM anti-T.cruzi well as some antibody subclasses, IgG1 and IgG2a and IG3. NO production and cytokine IL-4 increased during the initial phase of infection with decrease in the later stage of infection seventy days after infection being suggestive of immunomodulatory action in infection by T. cruzi. These results reinforcing aspects of the pathophysiology of Chagas disease and will allow understanding of the effectiveness of these nanoformulations of BNZ for the treatment of Chagas disease in the murine model in the future