Avaliação in vitro de inibidores peptídicos da β-secretase 1 para o tratamento da Doença de Alzheimer

O aumento da esperança média de vida nos países industrializados levou a uma alteração demográfica significativa, impulsionada pelo desequilíbrio entre a taxa de natalidade e de mortalidade. Deste modo, o envelhecimento da população resulta numa maior prevalência de doenças relacionadas com a idade avançada, como a diabetes, osteoporose, cancro e doenças neurodegenerativas. O presente trabalho centrado em torno da doença de Alzheimer, a forma mais comum de demência irreversível, visa responder à necessidade de desenvolver novas terapias com efeito retardador da doença, uma vez que os medicamentos atualmente disponíveis atuam de uma forma apenas sintomática. Desta forma, nesta tese de mestrado são testados quatro compostos de natureza peptídica que potencialmente evitam a progressão da doença de Alzheimer. Através da inibição da enzima β-Secretase 1, a principal responsável pela formação do péptido neurotóxico β-amilóide. Estes compostros, denominados ao longo da tese como inibidores A, B, C e D, foram desenhados a partir de um inibidor descrito na literatura, OM00-3 (1), ao qual foram introduzidas alterações de modo a melhorar as suas propriedades farmacocinéticas. Os testes realizados no presente trabalho tiveram três objectivos principais: (i) avaliar a capacidade de inibição da β-Secretase 1 e a selectividade em relação à β-Secretase 2, (ii) avaliar a resistência à metabolização na corrente sistémica e no cérebro e (iii) avaliar a capacidade de permear a barreira hematoencefálica. Verificou-se que todos os compostos preservam a função de inibição da β-Secretase 1 na escala nanomolar (2 e 3 nM) e apresentam selectividade em relação à enzima β-Secretase 2. A sua resistência à metabolização foi melhorada em relação ao inibidor inicial com tempos de semi-vida que variam entre a uma e as quatro horas. No que respeita aos ensaios de permeabilidade utilizando o modelo celular Caco-2, os resultados são indicativos da permeabilidade dos compostos A e C, contudo não foi ainda possível prová-lo consistentemente devido à irreprodutibilidade dos ensaios. O composto que apresentou melhor combinação de resultados foi o inibidor C, com um IC50=2,1 nM para a β-Secretase 1 e uma selectividade de 8,6x em relação à β-Secretase 2, sendo este o composto eleito para prossecução de ensaios in vivo