Integrões em bactérias de Gram-negativo em ambiente hospitalar

Mestrado em MicrobiologiaO aparecimento de surtos bacterianos tem sido um dos maiores problemas nas instituições hospitalares. O uso abusivo e indiscriminado de antibióticos tem conduzido à emergência de bactérias multiresistentes. Estas bactérias possuem diversos elementos genéticos móveis (plasmídeos, transposões, sequências de inserção e integrões) que contribuem para a disseminação de genes de resistência aos antibióticos entre diferentes espécies, por meio de um dos três mecanismos de transferência de genes de resistência entre células bacterianas: transformação, conjugação e transdução. A disseminação de integrões em bactérias de Gram negativo em meio hospitalar constituiu o objectivo do presente trabalho. As amostras foram recolhidas nas superfícies do Serviço de Medicina II (2008) e Serviço de Medicina Intensiva (2010), no Hospital Infante D. Pedro, Aveiro. Após o isolamento das bactérias em meio selectivo para bactérias de Gram-negativo (MacKonkey agar), todos os isolados foram analisados por BOX-PCR para avaliação da clonalidade, Foi pesquisada a presença de integrões de classe 1 e nos isolados positivos, foi amplificada, caracterizada e sequenciada a respectiva região variável. Os resultados mostraram a presença de integrões de classe 1 em diferentes espécies, tais como Klebsiella oxytoca, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae e Stenotrophomonas maltophilia tendo sido encontrado o mesmo tipo de integrãoem diferentes espécies. Assim, foi possível concluir que os integrões de classe 1 podem contribuir para a disseminação de genes de resistência, podendo por isso contribuir para a emergência de bactérias multirresistentes, sendo este um problema de preocupação a nível Mundial.The emergence of bacterial outbreaks has been the main problem in several hospitals. The excessive and indiscriminate use of antibiotics has led to the emergence of multiresistant bacteria, which possess mobile genetic elements (plasmids, transposons, insertion sequences and integrons) that contribute to the dissemination of antibiotic resistance genes between different species. There are three main mechanisms that allow transfer of resistance genes between bacterial cells: transformation, conjugation and transduction. The dissemination of integrons in Gram negative bacteria within the hospital environment contribute to the dissemination of antibiotic resistance genes, and constituted the main aim of the present work. The samples were collected from the inanimate surfaces of the Serviço de Medicina II 2008and Serviço de Medicina Intensiva 2010 of Hospital Infante D. Pedro, Aveiro. After the bacterial isolation in selective media for Gram-negative bacteria (MacKonkey agar), all isolates were selected, based on their clonality, using the molecular technique BOX-PCR. The presence of class 1 integrons was evaluated and in the positive isolates the variable region was amplified sequenced and characterized. Results showed the presence of class 1 integrons in different species, such as Klebsiella oxytoca, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae and Stenotrophomonas maltophilia, and the same array was present in different bacterial species. It can be concluded that class 1 integrons can contribute to the dissemination of antibiotic resistance genes, and can therefore, contribute to the emergence of multi-resistance strains