LPL gene in Portuguese patients with hypergliceridemia

Mestrado em Biologia Molecular e CelularForam identificados 2 pacientes não relacionados portadores de mutações no gene da LPL que levam a uma perda de função enzimática; portadores de Gly188Glu. De forma a fazer o despiste de mutações pontuais, o DNA genómico foi digerido com várias enzimas de restrição: NIa IV; Bfa I; Hinc II; Taq I; Ava II; Alu I and Rsa I.De seguida, foram sequenciados os exões 2-9 do gene da LPL, verificando-se a presença da mutação Gly188Glu nos pacientes 4 e 69. Estes pacientes apresentam hipertrigliceridemia moderada e níveis baixos de HDL enquanto que o paciente 69 tem também hipercolesterolemia. A combinação de hipertrigliceridemia com hipercolesterolemia, está associado a aterosclerose prematura. A determinação da estrutura do gene da LPL humana e o rápido progresso na biologia molecular tornou possível desvendar os mecanismos subjacentes a formas comuns de dislipidémia e hipertrigliceridemia. A técnica de PCR em conjunto com a sequenciação utilizadas neste estudo permitirão, sem dúvida, caracterizar as variantes estruturais da LPL. Estas variantes, por sua vez, permitirão determinar o papel das mutações da LPL nas desordens do metabolismo lipídico. ABSTRACT: We have identified 2 unrelated hypertriglyceridemic patients carrying LPL lossof- function mutation Gly188Glu. In order to promote a first screening for some point mutations, genomic DNA was digested with a diversity of restriction endonucleases: NIa IV; Bfa I; Hinc II; Taq I; Ava II; Alu I and Rsa I. After, exons 2 to 9 of the LPL gene were sequenced for these 2 patients, which revealed the presence of the Gly188Glu substitution in patients 4 and 69. These patients have decreased HDL cholesterol, and moderate hypertriglyceridemia. Patient nº 69 has also hypercholesterolemia. The combination of hypertriglyceridemia with hypercholesterolemia, which is associated with premature atherosclerosis. The determination of the structure of the human LPL gene and the fast progress in DNA technology has made it possible to unravel the mechanisms underlying clinically more common forms of dyslipidemia and hypertriglyceridemia. The PCR technique in conjunction with direct sequence analysis utilized in this study will undoubtedly facilitate the characterization of the structural variants of LPL. These variants will further aid in characterizing the role of LPL mutations in disorders of lipid metabolism