构建在真核细胞内转录表达乙型肝炎病毒(HBV)双靶区反义核酸重组载体用以抗HBV基因治疗的研究.方法为合成互补于HBV(ayw亚型)X区核苷酸X片段以及互补于HBV P区的P片段,利用基因重组技术将X、P片段分别正向、反向插入逆转录病毒载体pLXSN的相应酶切位点构建成单靶区重组载体质粒.在构建单靶区载体质粒的基础上,类似方法再构建双靶区重组载体质粒.经酶切电泳、PCR扩增和DNA测序鉴定成功构建了HBV双靶区反义核酸重组载体.为探索在真核细胞内转录表达HBV反义RNA的方法及研究多基因区抗病毒治疗和抗变异病毒打下基础.中国科学院资助项目0286-882
目的:将小鼠Aire基因定向连入MigR1-GFP质粒,得到长期稳定的Aire逆转录病毒表达载体,收集逆转录病毒上清感染胸腺基质细胞,为研究Aire在胸腺细胞终末分化中的作用奠定基础.方法:以小鼠胸腺...
目的:探讨人磷酸二脂酶5(PDE5)基因反义RNA重组腺病毒载体的构建方法.方法:根据基因库确定具有完整PDE5A1启动子活性的cDNA基因序列,并设计反义链,两端加内切酶修饰;通过转载体克隆方法构建...
以乙型肝炎病毒(HBV)X基因序列的异质性表现来探讨HBV准种在慢性感染者中的存在状态.以中国株HBV基因序列为依据,设计特异性多聚酶链反应引物,自9例慢性HBV感染患者血清中扩增HBV X基因,克隆...
目的:研究双靶区反义RNA的逆转录病毒载体的转染、表达及其抗乙肝病毒(HBV) 的作用.方法:合成互补于HBV X区(1400-1430)的X片段、互补于HBV P区(2375-2405) 的P片段,...
目的:探讨逆转录病毒介导的乙型肝炎病毒(HBV)X,P单、双靶区的反义RNA在乙型肝炎转基因小鼠肝细胞中HBV复制的影响.方法:构建表达HBV X,P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,与脂质体混合,...
目的探讨针对乙型肝炎病毒(HBV) X、P双靶区反义RNA对乙型肝炎转基因小鼠HBV复制和表达的影响.方法构建表达HBV X、P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,与脂质体混合,经尾静脉注入小鼠体内,...
目的探讨表达乙型肝炎病毒(HBV)双靶区反义RNA的逆转录病毒载体对HBV复制和表达的影响.方法用分子克隆法构建表达HBV X、P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,转染PA317细胞,用NIH3T3...
目的 构建乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)恩替卡韦耐药突变株表达质粒并对其体外复制病毒学特征进行研究.方法 以含1.2倍HBV DNA全基因的质粒pUC-HBV1.2-WT为...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体以用于抗HIV-1的研究.方法用RT-PCR从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,用基因重组技术将此目...
目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因的重组杆状病毒.方法构建含有HBV S基因的表达截体pFBDHTa-S,转化DH10Bac感受态菌.利用其含有的细菌...
目的:构建趋化因子受体CCR5,CXCR4双靶区反义RNA重组载体并获取重组腺病毒以用于抗HIV-1基因治疗的研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞中分别扩增出趋化因子受体CCR5,CX...
目的:构建趋化因子受体CXCR4反义 RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononucle...
目的:包装携带人白细胞介素12(IL-12)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究.方法:携带IL-12的逆转录病毒重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装,G418筛选.在NIH3T3细胞进行病毒...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,...
目的构建趋化因子受体CCR5反义核糖核酸(RNA)重组载体并获取重组腺病毒,用于抗艾滋病病毒1型(HIV-1)基因治疗研究.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,从健康人外周血单核细胞中扩增出...
目的:将小鼠Aire基因定向连入MigR1-GFP质粒,得到长期稳定的Aire逆转录病毒表达载体,收集逆转录病毒上清感染胸腺基质细胞,为研究Aire在胸腺细胞终末分化中的作用奠定基础.方法:以小鼠胸腺...
目的:探讨人磷酸二脂酶5(PDE5)基因反义RNA重组腺病毒载体的构建方法.方法:根据基因库确定具有完整PDE5A1启动子活性的cDNA基因序列,并设计反义链,两端加内切酶修饰;通过转载体克隆方法构建...
以乙型肝炎病毒(HBV)X基因序列的异质性表现来探讨HBV准种在慢性感染者中的存在状态.以中国株HBV基因序列为依据,设计特异性多聚酶链反应引物,自9例慢性HBV感染患者血清中扩增HBV X基因,克隆...
目的:研究双靶区反义RNA的逆转录病毒载体的转染、表达及其抗乙肝病毒(HBV) 的作用.方法:合成互补于HBV X区(1400-1430)的X片段、互补于HBV P区(2375-2405) 的P片段,...
目的:探讨逆转录病毒介导的乙型肝炎病毒(HBV)X,P单、双靶区的反义RNA在乙型肝炎转基因小鼠肝细胞中HBV复制的影响.方法:构建表达HBV X,P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,与脂质体混合,...
目的探讨针对乙型肝炎病毒(HBV) X、P双靶区反义RNA对乙型肝炎转基因小鼠HBV复制和表达的影响.方法构建表达HBV X、P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,与脂质体混合,经尾静脉注入小鼠体内,...
目的探讨表达乙型肝炎病毒(HBV)双靶区反义RNA的逆转录病毒载体对HBV复制和表达的影响.方法用分子克隆法构建表达HBV X、P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,转染PA317细胞,用NIH3T3...
目的 构建乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)恩替卡韦耐药突变株表达质粒并对其体外复制病毒学特征进行研究.方法 以含1.2倍HBV DNA全基因的质粒pUC-HBV1.2-WT为...
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目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因的重组杆状病毒.方法构建含有HBV S基因的表达截体pFBDHTa-S,转化DH10Bac感受态菌.利用其含有的细菌...
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目的:构建趋化因子受体CXCR4反义 RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononucle...
目的:包装携带人白细胞介素12(IL-12)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究.方法:携带IL-12的逆转录病毒重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装,G418筛选.在NIH3T3细胞进行病毒...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,...
目的构建趋化因子受体CCR5反义核糖核酸(RNA)重组载体并获取重组腺病毒,用于抗艾滋病病毒1型(HIV-1)基因治疗研究.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,从健康人外周血单核细胞中扩增出...
目的:将小鼠Aire基因定向连入MigR1-GFP质粒,得到长期稳定的Aire逆转录病毒表达载体,收集逆转录病毒上清感染胸腺基质细胞,为研究Aire在胸腺细胞终末分化中的作用奠定基础.方法:以小鼠胸腺...
目的:探讨人磷酸二脂酶5(PDE5)基因反义RNA重组腺病毒载体的构建方法.方法:根据基因库确定具有完整PDE5A1启动子活性的cDNA基因序列,并设计反义链,两端加内切酶修饰;通过转载体克隆方法构建...
以乙型肝炎病毒(HBV)X基因序列的异质性表现来探讨HBV准种在慢性感染者中的存在状态.以中国株HBV基因序列为依据,设计特异性多聚酶链反应引物,自9例慢性HBV感染患者血清中扩增HBV X基因,克隆...
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