DNA/子弹.基因枪转染的效率为10.5%&#177;2.4%(n=3),电转染方法 为45.2%&#177;5.6%(n=3),而脂质体方法 只有个别DC表达荧光蛋白,三者比较差异有统计学意义(P<0.01).基因枪方法 转染的DC能够保持其特殊细胞形态,细胞表而标志在转染中无明显变化,而电转染后细胞大量死亡.应用基因枪转染方法,基因疫苗质粒IgHV1-GM-CSF/pcDNA3.0在IX;中得到瞬时表达.结论 基因枪颗粒轰击可使基因疫苗在DC中成功表达,是临床细胞免疫治疗中DC转染的一种可行选择.科技部国际科技合作重大项目; 国家高技术研究发展计划(863计划)中文核心期刊要目总览(PKU)中国科技核心期刊(ISTIC)中国科学引文数据库(CSCD)091066-10693
建立了两步连续离子交换制备色谱分离、纯化聚乙二醇与重组人粒细胞集落刺激因子(Recombinant human granulocytestimulating factor,rhG-CSF)偶联物的方法...
通过检索GenBank的表达序列标签(EST)数据库并结合cDNA末端快速扩增法(RACE),从小鼠胸腺克隆到一个新的cDNA序列,并从人类肝癌组织中克隆出了其同源cDNA.根据读码框架分析,这两个c...
目的:构建人β2-microglobulin(β2-M)基因的原核表达载体,在大肠杆菌中高效表达β2-M蛋白质并进行纯化,为构建MHC-肽四聚体奠定基础.方法:从人外周血单核细胞中提取总RNA,采用R...
通过特异引物扩增出去掉终止密码的mCCL19编码序列,经酶切、亚克隆、拼接构建了真核表达载体pcDNA3.1-mCCL19Ig,酶切和测序鉴定插入序列;将重组质粒转染CHO细胞进行体外表达,通过RT-...
目的 分析小鼠胸腺树突状细胞株(MTDC)中化学趋化因子的类型。方法 以自行设计的引物,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从小鼠MTDC细胞株扩增SDF-1,IP-10,KC等几种化学趋化因...
目的 探讨转化生长因子(TGF)- β1基因转染对未成熟树突状细胞(imDC)细胞表型和功能的影响.方法 分别从Wistar大鼠骨髓培养imDC及成熟树突状细胞(mDC),用TGF-β1-pcDNA3...
为了制作CgA基因反义RNA转基因小鼠,构建了质粒pCAS2C,并把pCAS2C中完整的反义表达框显微注射入小鼠受精卵的雌原核中,随后将注射过DNA的受精卵移植入假孕鼠的输卵管中.假母所产子一代都用p...
目的构建人Ro60 cDNA的杆状病毒表达载体.方法采用逆转录-PCR技术从Hela细胞RNA中扩增Ro60 cDNA,定向插入杆状病毒转移载体pFastBac HTc,转化大肠杆菌DH10 Bac进...
基因组药物(Genome-baseddrug)是指利用基因序列数据,经生物信息学分析、高通量基因表达、高通量功能筛选和体内外药效研究开发得到的基因工程新药或作为药物靶标开发的新药.基因组药物的优势是取...
目的检测尤文肉瘤融合基因EWS-FLI1和人粒-单核细胞集落刺激因子(hGMCSF)基因修饰的树突细胞(DC)疫苗对尤文肉瘤细胞株A673的杀伤作用.方法利用hGM-CSF腺病毒(AdhGM-CSF)...
目的探讨甲基汞对小鼠胸腺淋巴细胞DNA损伤的作用. 方法采用单细胞凝胶电泳技术进行检测.结果 1/200~1/2LD 50,剂量组的甲基汞均可引起淋巴细胞DNA不同程度电泳迁移;A组(1/200LD5...
利用GenBank中的数据,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)从人的cDNA文库中克隆得到功能基因TOX(thymocyte selection-asso...
目的:克隆胸腺细胞发育相关新基因.方法:应用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH),构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库,结合R...
目的:用显微注射法制备携带EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)膜抗原(membrane antigen,MA)基因-BLLF1的转基因小鼠.方法:对38只昆明种小鼠进行超排卵,收集...
利用真核表达载体pVAX1构建HIV-2 gag-gp105嵌合基因的重组质粒pVAX1gag-gp105,将其转入BHK21细胞中,利用间接免疫荧光方法检测其表达情况.进一步分别将核酸疫苗质粒pVA...
建立了两步连续离子交换制备色谱分离、纯化聚乙二醇与重组人粒细胞集落刺激因子(Recombinant human granulocytestimulating factor,rhG-CSF)偶联物的方法...
通过检索GenBank的表达序列标签(EST)数据库并结合cDNA末端快速扩增法(RACE),从小鼠胸腺克隆到一个新的cDNA序列,并从人类肝癌组织中克隆出了其同源cDNA.根据读码框架分析,这两个c...
目的:构建人β2-microglobulin(β2-M)基因的原核表达载体,在大肠杆菌中高效表达β2-M蛋白质并进行纯化,为构建MHC-肽四聚体奠定基础.方法:从人外周血单核细胞中提取总RNA,采用R...
通过特异引物扩增出去掉终止密码的mCCL19编码序列,经酶切、亚克隆、拼接构建了真核表达载体pcDNA3.1-mCCL19Ig,酶切和测序鉴定插入序列;将重组质粒转染CHO细胞进行体外表达,通过RT-...
目的 分析小鼠胸腺树突状细胞株(MTDC)中化学趋化因子的类型。方法 以自行设计的引物,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从小鼠MTDC细胞株扩增SDF-1,IP-10,KC等几种化学趋化因...
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目的检测尤文肉瘤融合基因EWS-FLI1和人粒-单核细胞集落刺激因子(hGMCSF)基因修饰的树突细胞(DC)疫苗对尤文肉瘤细胞株A673的杀伤作用.方法利用hGM-CSF腺病毒(AdhGM-CSF)...
目的探讨甲基汞对小鼠胸腺淋巴细胞DNA损伤的作用. 方法采用单细胞凝胶电泳技术进行检测.结果 1/200~1/2LD 50,剂量组的甲基汞均可引起淋巴细胞DNA不同程度电泳迁移;A组(1/200LD5...
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目的:克隆胸腺细胞发育相关新基因.方法:应用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH),构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库,结合R...
目的:用显微注射法制备携带EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)膜抗原(membrane antigen,MA)基因-BLLF1的转基因小鼠.方法:对38只昆明种小鼠进行超排卵,收集...
利用真核表达载体pVAX1构建HIV-2 gag-gp105嵌合基因的重组质粒pVAX1gag-gp105,将其转入BHK21细胞中,利用间接免疫荧光方法检测其表达情况.进一步分别将核酸疫苗质粒pVA...
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目的:构建人β2-microglobulin(β2-M)基因的原核表达载体,在大肠杆菌中高效表达β2-M蛋白质并进行纯化,为构建MHC-肽四聚体奠定基础.方法:从人外周血单核细胞中提取总RNA,采用R...