以脂质体介导法将含有t-PA突变基因的真核表达载体pCSRA及pCSRK分别转染CHO-d hfr -,经G418及DMEM双重选择,获得两者的稳定表达细胞株.结果表明,表达产物具有良好溶纤活性;Western印迹实验证明,产物具有特异抗原性;经多次传代,细胞株具有良好的稳定性.比较了无血清培养基CHO-S-SFMⅡ与常规培养基DMEM培养条件下pCSRK细胞株产物的表达量,前者约为后者的2倍,表明无血清培养基SFM有可能用于药用性蛋白的生产.实验为t-PA新型突变体的临床应用打下一定基础.教育部高校骨干教师资助计划; 宁夏大学校科研和教改项目中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)04583-5874
构建TF-1细胞凋亡相关基因19(TF-1 cell apoptosis related gene-19,TFAR19)缺失突变体的原核表达载体,获取缺失突变体蛋白,用于TFAR19促凋亡分子机理的研...
目的：体外克隆表达并纯化C7orf69重组蛋白，对C7orf69蛋白进行生物信息学分析。方法 PCR扩增C7orf69目的基因片段，构建原核表达载体，转化BL21，IPTG诱导目的蛋白表达，SDS-P...
调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是一种具有免疫调节功能的成熟T细胞亚群.在1995年,Sakaguchi等首次报道了将去除了CD25+细胞的CD4+T细胞过继给T细胞缺陷...
目的:克隆胸腺细胞发育相关新基因.方法:应用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH),构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库,结合R...
目的体外建立可长期培养的抗原特异性T细胞系及克隆,并分析其T细胞受体的使用情况.方法用卵清白蛋白(OVA)免疫BALB/c小鼠,取淋巴结细胞在体外用抗原反复刺激建立抗原特异性T细胞系,通过有限稀释法进...
目的 比较一个位点不同碱基的鼠p53minigene对细胞生长的影响。方法 三种小鼠p53minigene[野生型(Arg)、假野生突变型(Leu)和突变型(His)]真核表达载体，由Lipofect...
目的体外建立可长期生长的自身反应性T细胞系及克隆,并分析其T细胞受体的使用情况.方法用狼疮小鼠BXSB自身脾脏作为刺激细胞,在体外建立长期生长的自身反应T细胞系(ATL),通过有限稀释法进行克隆,应用...
目的 探讨转入B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测.方法 采用脂质体介导法将已建好的真核表达质粒pEGFP-C1-B7-H3导入人鳞癌细胞Tca8113中(Tca8113/B7-H3), RT-PC...
该研究室利用BXSB狼疮模型小鼠,成功地构建了自身反应性T细胞系(atuoreactive T cell line,ATL)和自身反应性T细胞克隆(antoreactive T cell clone,...
目的:构建针对TERF2IP1基因的短发夹RNA (shRNA)表达载体,在HCT116细胞中鉴定该载体对TERF2IP1基因的干扰效果.方法:设计针对TERF2IP1基因的shRNA序列,将其克隆至...
目的:TFAR19基因(TF-1 cell apoptosis related gene19)是北京大学人类疾病基因中心从人红白血病细胞株TF-1细胞中克隆到的凋亡相关新基因之一(GenBank登记号...
本研究探讨自体调节性T细胞对T细胞淋巴瘤细胞系EL4的作用及其机制.应用免疫磁珠分离法(MACS)分选获得C57BL/6小鼠CD4+ CD25+T细胞(Treg细胞),流式细胞术检测细胞纯度及Foxp...
将正常脐带血TCR β(T细胞受体β)重排基因制备成基因阵列,观察能否反映肿瘤或自身免疫病患者的淋巴细胞克隆的变化.方法采用RT-PCR扩增混合10例脐带血的cDNA不同家族的TCR β可变区基因全部...
目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR...
为探讨p21WAF1对K562细胞药物敏感性的调节作用及其对VP-16诱导的K562细胞凋亡的影响,构建了p21WAF1逆转录病毒表达载体,体外转染白血病细胞系K562.经RT-PCR和Western...
构建TF-1细胞凋亡相关基因19(TF-1 cell apoptosis related gene-19,TFAR19)缺失突变体的原核表达载体,获取缺失突变体蛋白,用于TFAR19促凋亡分子机理的研...
目的：体外克隆表达并纯化C7orf69重组蛋白，对C7orf69蛋白进行生物信息学分析。方法 PCR扩增C7orf69目的基因片段，构建原核表达载体，转化BL21，IPTG诱导目的蛋白表达，SDS-P...
调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是一种具有免疫调节功能的成熟T细胞亚群.在1995年,Sakaguchi等首次报道了将去除了CD25+细胞的CD4+T细胞过继给T细胞缺陷...
目的:克隆胸腺细胞发育相关新基因.方法:应用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH),构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库,结合R...
目的体外建立可长期培养的抗原特异性T细胞系及克隆,并分析其T细胞受体的使用情况.方法用卵清白蛋白(OVA)免疫BALB/c小鼠,取淋巴结细胞在体外用抗原反复刺激建立抗原特异性T细胞系,通过有限稀释法进...
目的 比较一个位点不同碱基的鼠p53minigene对细胞生长的影响。方法 三种小鼠p53minigene[野生型(Arg)、假野生突变型(Leu)和突变型(His)]真核表达载体，由Lipofect...
目的体外建立可长期生长的自身反应性T细胞系及克隆,并分析其T细胞受体的使用情况.方法用狼疮小鼠BXSB自身脾脏作为刺激细胞,在体外建立长期生长的自身反应T细胞系(ATL),通过有限稀释法进行克隆,应用...
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本研究探讨自体调节性T细胞对T细胞淋巴瘤细胞系EL4的作用及其机制.应用免疫磁珠分离法(MACS)分选获得C57BL/6小鼠CD4+ CD25+T细胞(Treg细胞),流式细胞术检测细胞纯度及Foxp...
将正常脐带血TCR β(T细胞受体β)重排基因制备成基因阵列,观察能否反映肿瘤或自身免疫病患者的淋巴细胞克隆的变化.方法采用RT-PCR扩增混合10例脐带血的cDNA不同家族的TCR β可变区基因全部...
目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR...
为探讨p21WAF1对K562细胞药物敏感性的调节作用及其对VP-16诱导的K562细胞凋亡的影响,构建了p21WAF1逆转录病毒表达载体,体外转染白血病细胞系K562.经RT-PCR和Western...
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目的：体外克隆表达并纯化C7orf69重组蛋白，对C7orf69蛋白进行生物信息学分析。方法 PCR扩增C7orf69目的基因片段，构建原核表达载体，转化BL21，IPTG诱导目的蛋白表达，SDS-P...
调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是一种具有免疫调节功能的成熟T细胞亚群.在1995年,Sakaguchi等首次报道了将去除了CD25+细胞的CD4+T细胞过继给T细胞缺陷...
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