Free fatty acids act on gene and protein expression and tyrosine phosphorylation of Leptin-receptor in rat skeletal muscle cells

目的探讨游离脂肪酸是否会对大鼠骨骼肌细胞Leptin受体的基因、蛋白表达及酪氨酸磷酸化产生一定的影响,进而导致胰岛素抵抗及葡萄糖代谢的异常. 方法分离、培养新生Sprague-Dawley大鼠骨骼肌细胞,分别与软脂酸(0.25 mmol*L-1)或油酸(0.125 mmol*L-1)孵育12, 24和36 h,提取蛋白后用Western印迹法检测Leptin受体的蛋白水平. 用RT-PCR检测胰岛细胞内Leptin受体RNA含量的变化. 应用免疫沉淀法检测Leptin受体的酪氨酸磷酸化程度. 结果软脂酸和油酸孵育后大鼠骨骼肌细胞Leptin受体的蛋白表达水平在孵育12和24 h后同对照组相比无显著变化,在孵育36 h后同对照组相比显著下调[软脂酸(0.36±0.03)和油酸(0.35±0.04) vs对照(0.39±0.05), P<0.05];Leptin受体的RNA水平在孵育12 h后同对照组相比无显著变化,孵育24和36 h后显著下调[24 h:软脂酸(0.26±0.03)和油酸(0.26±0.04) vs对照(0.31±0.03), P<0.05; 36 h:软脂酸(0.25±0.04)和油酸(0.23±0.03) vs对照(0.29±0.01), P<0.05];Leptin受体的酪氨酸磷酸化程度在在孵育12 h后同对照组相比无显著变化,孵育24和36 h后显著下调[24 h:软脂酸(0.17±0.05)和油酸(0.15±0.06) vs对照(0.21±0.07), P<0.05;36 h:软脂酸(0.15±0.04)和油酸(0.13±0.04) vs对照(0.24±0.06), P<0.05]. 结论游离脂肪酸可对大鼠骨骼肌Leptin受体的基因及蛋白表达水平以及磷酸化程度产生一定的抑制作用,从而进一步引起胰岛素抵抗.中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)0141307-13102