Suppression subtractive hybridization for identifying differentially expressed genes in renal cell carcinoma

目的克隆并鉴定肾癌与正常肾之间差异表达的基因，为研究肾癌发生发展的分子生物学机制奠定基础。 方法应用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH），构建人肾癌组织与正常肾组织差异表达的cDNA消减文库，并从中克隆鉴定出肾癌差异表达的基因。 结果构建成功高消减效率的人肾癌组织cDNA消减文库，对其中10个克隆插入的cDNA片段进行测序后经GenBank检索表明10个片段均为未知新序列，其中RCC18为5个拷贝，这提示以上10个cDNA片段可能来自6个新基因。Northern blotting分析显示RCC18在肾癌组织中有明显表达，而在正常肾组织中无表达，这证明RCC18是肾癌特异表达的新基因。应用SMART RACE技术获得RCC18基因的全长。 结论人肾癌cDNA消减文库的建立为进一步大批量筛选、克隆肾癌特异性表达的未知新基因奠定了基础。初步筛选出的新基因为研究肾癌发生发展中的分子生物学机制提供了重要线索。08807-81211