Add to ORKG目的 原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定.方法 用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序列,构建原核表达载体pET-GST-gD MED；将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli) BL21(DE3) pLysS,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过GST·Bind纯化试剂盒对gDMED融合蛋白进行纯化；Western blot对gD MED融合蛋白的免疫活性进行分析.结果 HSV-1 gD在266～394区域富含抗原表位,人工合成了该区域的cDNA序列,并成功构建了原核表达载体pET-GST-gD MED；gD MED融合蛋白主要以可溶形式表达,分子质量约为45 ku,纯度能达95％；Western blot结果显示,gD MED融合蛋白能与感染HSV-1患者的血清发生特异结合.结论 成功表达和纯化了具有良好抗原性的HSV-1 gD MED融合蛋白,为HSV免疫诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制提供了依据.中文核心期刊要目总览(PKU)中国科技核心期刊(ISTIC)中国科学引文数据库(CSCD)03350-3553
本研究目的是利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统建立戊型肝炎病毒(HEV)p495蛋白的高效稳定表达和可放大纯化的方法,研究其理化性质和解析三维结构,与上市戊肝疫苗益可宁(Hecolin)进行免疫原性的比较...
近年来基因工程抗体成为现代生物学及医学领域的研究热点，具有不可估量的市场前景。如何经济高效地表达具有活性的抗体分子，成为基因工程抗体研究中亟需解决的问题。目前CHO表达系统发展较成熟，在抗体表达中应用...
目的 构建卵巢癌抗独特型单链抗体6B11ScFv与小鼠热休克蛋白70(mHSP70)融合蛋白6811ScFv/mHSP70,并初步鉴定其免疫活性.方法 根据Genebank上已发表的mHSP70基因序...
目的:构建人Cdc25C基因原核表达载体,获得纯化的GST-Cdc25C融合蛋白,并对其功能进行初步检测.方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增Cdc25C基因编码序列,将其正确插入pGEX-KG载体,重...
目的 对单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质料装载降钙素基因相关肽,并进行包装和扩增.方法 分别钓取pac 基因和γ134.5基因,克隆入pMD18-T载体中.pSV载体经HindⅢ和BamH Ⅰ双酶切,获得la...
背景与目的:阻断肿瘤组织内血管生成和血管化是一个很有发展前景的灭瘤途径之一.胸苷激酶自杀基因系统(herpes simplex virus-thymidinekinase,HSV-tk/GCV)能有效...
目的探讨在原核细胞中表达人血小板膜糖蛋白Ⅵ(GPVI)胞外区片段,制备其多克隆抗体.方法采用PCR技术扩增人血小板GPVI胞外区片段123 aa～268 aa的基因序列,构建其原核表达载体,在大肠杆菌...
目的:研究SARS病毒感染后机体产生保护性免疫应答的规律和可能机制.方法:通过生物信息学分析,在原核表达系统中表达了SARS病毒S1蛋白.利用SARS流行前正常人血清和6份SARS患者恢复期的血清,对...
目的:构建UNC5CL基因的原核表达载体,纯化GST-UNC5CL融合蛋白,并以其为抗原免疫家兔,制备抗人UNC5CL多克隆抗体,并鉴定其反应性和特异性.方法:用PCR方法扩增UNC5CL基因(表达其...
目的:获得纯化的重组SARS病毒S1蛋白N端部分,研究其与机体产生针对SARS病毒免疫应答的规律和机制.方法:将编码SARS病毒S1蛋白N端334个氨基酸残基的基因进行克隆,并在原核表达系统中表达,获...
目的:在原核细胞中表达胸腺发育相关分子RS21-C6重组蛋白,制备RS21-C6的多克隆抗体,研究RS21-C6分子在胸腺组织中的分布.方法: 在大肠杆菌中表达和纯化RS21-C6重组蛋白,免疫家兔制...
目的:从自然界中分离鉴定产3α-羟类固醇脱氢酶(3α-hydroxysteroid dehydrogenase,3α-HSD)的睾丸酮丛毛单胞菌,并在大肠杆菌(E.coli.)中克隆表达3α-HSD....
目的:构建变形链球菌comE基因原核表达载体,诱导ComE 融合蛋白高效表达,获取高质量的ComE 融合蛋白.方法:提取变形链球菌基因组,PCR 扩增得到变形链球菌comE基因片段,BamH Ⅰ和Xh...
近年妊娠合并生殖器疱疹(Genital Herpes Simplex)和新生儿单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus, HSV)感染呈上升趋势,其中60%～80%的母婴传播发生在妊娠晚...
从土壤中分离睾酮丛毛单胞菌,提取其基因组DNA,PCR扩增3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)基因.以质粒pET-15b为载体,构建3α-HSD的原核表达系统.经IPTG诱导后,得到了具有酶活性的融合...
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