为探讨p21WAF1对K562细胞药物敏感性的调节作用及其对VP-16诱导的K562细胞凋亡的影响,构建了p21WAF1逆转录病毒表达载体,体外转染白血病细胞系K562.经RT-PCR和Western印迹检测得到稳定表达p21WAF1的K562-p21WAF1细胞克隆后,用MTT法和存活细胞计数法检测转染p21WAF1的K562细胞对VP-16在剂量和作用时间上的敏感性变化,用DNA凋亡片段分析和流式细胞术检测其对VP-16诱导的K562细胞凋亡的影响.实验结果显示,外源性p21WAF1的表达明显降低了VP-16诱导的K562细胞凋亡,降低了K562细胞对VP-16的敏感性.以上结果表明,p21WAF1能通过抑制K562细胞的凋亡来降低其对VP-16的敏感性.0131-341
目的:通过人工改变逆转录病毒多聚腺苷酸化信号 ,检测病毒转录能否产生病毒-宿主融合转录产物及其是否具有转化细胞的能力,探讨病毒致癌的机制.方法:用分子生物学技术人工定点突变鼠逆转录病毒多聚腺苷酸化信号...
[[abstract]]人類乳突病毒是一族小型的DNA病毒可以引起數種人類疾病，其中第十六型及第十八型人類乳突病毒已被證實與子宮頸癌的形成與惡化有相當密切的關係。這類高危險型人類乳突病毒在感染細胞後會...
构建TF-1细胞凋亡相关基因19(TF-1 cell apoptosis related gene-19,TFAR19)缺失突变体的原核表达载体,获取缺失突变体蛋白,用于TFAR19促凋亡分子机理的研...
目的探讨p21WAF1对白血病细胞系K562增殖及其对化疗药物足叶乙甙(Vp16)敏感性的影响.方法构建p21WAF1逆转录病毒表达载体pLXSN-p21WAF1,将pLXSN-p21WAF1和空载体...
目的:应用p16(MTS1)反义寡核苷酸抑制转染p16逆转录病毒载体后外源性p16基因的表达,减弱p16表达对包装细胞的生长抑制作用.方法:合成p16 cDNA起始密码子区的反义寡核苷酸和正义寡核苷酸...
将p16抑癌基因转入p16阴性的人红白血病细胞株K562,采用微吸管技术并配合某些生物物理技术,研究K562细胞在转基因前后生物物理特性的改变.结果表明,p16基因的引入使K562细胞表面电荷密度增加...
目的通过观察人类DNA损伤修复基因hR24L转染对MCF7细胞增殖周期的影响,进一步了解其功能及作用机制.方法分别用正义和反义hR24L逆转录病毒表达载体(pDor-neo)重组体转染MCF7细胞,观...
以脂质体介导法将含有t-PA突变基因的真核表达载体pCSRA及pCSRK分别转染CHO-d hfr -,经G418及DMEM双重选择,获得两者的稳定表达细胞株.结果表明,表达产物具有良好溶纤活性;We...
目的:观察质粒转染对细胞天然β2-肾上腺素受体(β2-AR)表达量的影响.方法 :将不携带外源目的基因的pREP4质粒和携带α1B-AR或β1-AR cDNA的p REP4质粒,采用脂质体和磷酸钙沉淀...
目的 比较一个位点不同碱基的鼠p53minigene对细胞生长的影响。方法 三种小鼠p53minigene[野生型(Arg)、假野生突变型(Leu)和突变型(His)]真核表达载体，由Lipofect...
为了探索血管内皮细胞生长因子(VEGF)在K562细胞β1整合素活化功能中的作用,利用转染正义(S)、反义(As)VEGF121 cDNA及空载体(V,pcDNa3)的不同K562细胞株,通过流式细胞...
脂质体介导法分别介导正、反义p16逆转录病毒表达载体转染人胚肺二倍体成纤维细胞,经鉴定后,分别用Hoechst33342/PI双染、TUNEL、DNA 1adder分析检测各转染细胞对H202的敏感性...
目的观察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)促肿瘤细胞增生的信号转导方式.方法从人脐带血清中提取的AFP,作用于体外培养的NIH3T3细胞,用噻唑蓝(MTT)染色计数法,3H-脱氧胸...
p33ING1b是一个较晚发现的肿瘤抑制基因ING1的主要表达形式,但是它在细胞衰老过程中的作用特别是对衰老细胞DNA损伤修复的影响还没有被阐明.本研究首先用2BS细胞构建了细胞衰老模型,通过RT-P...
目的研究在过氧化物酶体增长因子活化受体δ(PPARδ)表达中的相关调控因子.方法用RT-PCR扩增人类PPARδ启动子序列,通过Deletion及重组将不同长短的PPARδ启动子序列转化到PGL3-b...
目的:通过人工改变逆转录病毒多聚腺苷酸化信号 ,检测病毒转录能否产生病毒-宿主融合转录产物及其是否具有转化细胞的能力,探讨病毒致癌的机制.方法:用分子生物学技术人工定点突变鼠逆转录病毒多聚腺苷酸化信号...
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构建TF-1细胞凋亡相关基因19(TF-1 cell apoptosis related gene-19,TFAR19)缺失突变体的原核表达载体,获取缺失突变体蛋白,用于TFAR19促凋亡分子机理的研...
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