应用PCR技术获得肿瘤相关抗原HCA520编码基因,构建至pGEM-T Easy载体,测序正确后,亚克隆至pEGFP-N1载体,1%的琼脂糖电泳得到两条带,与预期结果相同;鉴定正确的基因一过性转染至CHO细胞,共聚焦显微镜观察HCA520基因编码蛋白主要位于胞浆靠近胞膜处,为HCA520功能的进一步研究打下了基础.国家重点基础研究发展计划(973计划); 北京市自然科学基金中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)02193-1962
为了研究辐射相关的hsa-miR-663在肿瘤细胞辐射应答通路中的功能，本实验人工合成 其前体并构建入表达载体pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR-663，进一步通过BP/LR重组反应 将hs...
目的:提高Klenow酶的热稳定性和储藏稳定性.方法:利用PCR的方法扩增DH5α染色体DNA,构建编码Klenow和人血清白蛋白第三功能区(HSA-D3)的融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中获得高效表...
目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR...
目的:构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF-α)基因的真核表达载体.方法:应用RT-PCR的方法从足月妊高征患者的胎盘组织中,扩增出hTNF-αcDNA,连接至载体pMD18-Tv...
目的 为进一步研究脂联素(ADPN)的功能提供实验基础,构建含重组人脂联素(hADPN)真核表达载体的3T3-L1细胞株.方法 酶切载有人脂联素cDNA的重组克隆质粒pMD18-T和真核表达质粒pcD...
目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)结构蛋白的真核表达载体.方法:用RT-PCR方法扩增HCV结构基因,并将其克隆入真核表达载体pcDNA3中,用磷酸钙转染法将其转入Sp2/0细胞,用免疫组化法检测细胞中...
目的:构建针对TERF2IP1基因的短发夹RNA (shRNA)表达载体,在HCT116细胞中鉴定该载体对TERF2IP1基因的干扰效果.方法:设计针对TERF2IP1基因的shRNA序列,将其克隆至...
通过特异引物扩增出去掉终止密码的mCCL19编码序列,经酶切、亚克隆、拼接构建了真核表达载体pcDNA3.1-mCCL19Ig,酶切和测序鉴定插入序列;将重组质粒转染CHO细胞进行体外表达,通过RT-...
目的采用反转录PCR(RT-PCR)构建人甲胎蛋白(Alpha-Fetoprotein, AFP)全长基因真核表达载体,为下一步应用以AFP蛋白为靶点的基因治疗作准备.方法体外培养人肝癌细胞HepG2...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,...
目的:利用RNA干扰(RNAi技术,以人组织因子(TF)基因为靶基因,构建特异性的RNA干扰真核细胞表达载体.方法:根据GenBank提供的人TF基因的核苷酸序列,设计具有小发夹结构的2条DNA序列,...
目的:构建趋化因子受体CXCR4反义 RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononucle...
目的:克隆小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因的cDNA,构建AR真核表达载体,并在睾丸支持细胞TM4中进行表达和鉴定.方法:应用RT-PCR法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正...
目的:研究PKCα结构与转位的关系.方法:用PCR的方法构建了4个PKCα突变体,在DNA连接酶的作用下与pEGFP-N1结合后转移至质粒中,构建PKCα突变体-EGFP真核表达载体.观察它们在C2C...
目的对融合基因GM-CSF/Fcγ2进行定点突变,去除其补体结合位点,构建GM-CSF/Fcγ2-融合蛋白真核表达载体.方法通过设计突变引物,利用PCR定点突变技术扩增融合基因GM-CSF/Fcγ2-...
为了研究辐射相关的hsa-miR-663在肿瘤细胞辐射应答通路中的功能，本实验人工合成 其前体并构建入表达载体pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR-663，进一步通过BP/LR重组反应 将hs...
目的:提高Klenow酶的热稳定性和储藏稳定性.方法:利用PCR的方法扩增DH5α染色体DNA,构建编码Klenow和人血清白蛋白第三功能区(HSA-D3)的融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中获得高效表...
目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR...
目的:构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF-α)基因的真核表达载体.方法:应用RT-PCR的方法从足月妊高征患者的胎盘组织中,扩增出hTNF-αcDNA,连接至载体pMD18-Tv...
目的 为进一步研究脂联素(ADPN)的功能提供实验基础,构建含重组人脂联素(hADPN)真核表达载体的3T3-L1细胞株.方法 酶切载有人脂联素cDNA的重组克隆质粒pMD18-T和真核表达质粒pcD...
目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)结构蛋白的真核表达载体.方法:用RT-PCR方法扩增HCV结构基因,并将其克隆入真核表达载体pcDNA3中,用磷酸钙转染法将其转入Sp2/0细胞,用免疫组化法检测细胞中...
目的:构建针对TERF2IP1基因的短发夹RNA (shRNA)表达载体,在HCT116细胞中鉴定该载体对TERF2IP1基因的干扰效果.方法:设计针对TERF2IP1基因的shRNA序列,将其克隆至...
通过特异引物扩增出去掉终止密码的mCCL19编码序列,经酶切、亚克隆、拼接构建了真核表达载体pcDNA3.1-mCCL19Ig,酶切和测序鉴定插入序列;将重组质粒转染CHO细胞进行体外表达,通过RT-...
目的采用反转录PCR(RT-PCR)构建人甲胎蛋白(Alpha-Fetoprotein, AFP)全长基因真核表达载体,为下一步应用以AFP蛋白为靶点的基因治疗作准备.方法体外培养人肝癌细胞HepG2...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,...
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目的:构建趋化因子受体CXCR4反义 RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononucle...
目的:克隆小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因的cDNA,构建AR真核表达载体,并在睾丸支持细胞TM4中进行表达和鉴定.方法:应用RT-PCR法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正...
目的:研究PKCα结构与转位的关系.方法:用PCR的方法构建了4个PKCα突变体,在DNA连接酶的作用下与pEGFP-N1结合后转移至质粒中,构建PKCα突变体-EGFP真核表达载体.观察它们在C2C...
目的对融合基因GM-CSF/Fcγ2进行定点突变,去除其补体结合位点,构建GM-CSF/Fcγ2-融合蛋白真核表达载体.方法通过设计突变引物,利用PCR定点突变技术扩增融合基因GM-CSF/Fcγ2-...
为了研究辐射相关的hsa-miR-663在肿瘤细胞辐射应答通路中的功能，本实验人工合成 其前体并构建入表达载体pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR-663，进一步通过BP/LR重组反应 将hs...
目的:提高Klenow酶的热稳定性和储藏稳定性.方法:利用PCR的方法扩增DH5α染色体DNA,构建编码Klenow和人血清白蛋白第三功能区(HSA-D3)的融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中获得高效表...
目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR...
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