本研究目的是获得特异性抗人CD154单克隆抗体.利用特异引物,通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增出编码CD154分子的cDNA全长,将其克隆在谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX4T-3中,转染大肠杆菌Jm109经诱导获得GST-CD154表达.融合蛋白经分离纯化后,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术,通过ELISA双筛,得到2株抗CD154单抗(1D3和5H4).其亚型分别是IgG2a和IgG1.又将CD154 cDNA全长构建真核表达载体pcDNA3-CD154,并转染COS细胞,以G418筛选后,经RT-PCR结果证实pcDNA3-CD154已成功转染COS细胞.所获单抗对转染CD154的COS细胞和刺激活化的人淋巴细胞有特异性结合反应,为进一步研究单抗功能奠定了实验基础.中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)03173-1762
目的:获得1A6/DRIM的N端特异性抗体并对其在细胞内的定位进行分析.方法:针对1A6/DRIM的N端多肽用多通道同步固相全自动合成系统合成,以无免疫原性的赖氨酸结构为核心偶联,将此多聚抗原肽(mu...
单克隆抗体(Monoclonal Antibody,MAb)183B2是该研究室用上皮性卵巢癌组织粗提液免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备的一株具有较好选择性的单抗.在免疫组化染色及放免显像中均显示较好的特...
采用基因工程技术,将小鼠6C6单克隆抗体可变区基因与人抗体恒定区基因连接,构建了鼠-人6C6嵌合抗体基因,并在CHO细胞中高效表达.利用Protein A亲和层析柱从细胞培养上清中分离纯化6C6嵌合抗...
目的:制备抗CMTM4的多肽抗体并鉴定其性能.方法:通过TMHMM、DNAStar等软件对CMTM4的3种剪接体,CMTM4-v1,v2和v3的蛋白序列进行分析,选取了4段序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素...
目的: 制备抗p185erbB2单克隆抗体,并研究其对表达p185erbB2肿瘤细胞的结合及生长抑制作用.为后续工作奠定基础.方法:用NIH3T3-erbB2细胞免疫BALB/c小鼠,制备抗p185e...
目的:CMTM1-V17是我室克隆的人类新基因,为进一步研究CMTM1-v17的功能,需制备高纯度的CMTM1-v17的抗体.方法:根据生物信息学分析的结果,用PCR法扩增人CMTM1-v17分子C端...
目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定. 方法用重组 CYFRA21-1蛋白免疫 BALB/c 小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓...
目的:制备抗人乳腺癌单克隆抗体(McAb),用于临床肿瘤的免疫病理诊断与分型研究,为药物导向诊断和治疗奠定基础.方法:以乳腺癌细胞系ZR75免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进...
目的:构建UNC5CL基因的原核表达载体,纯化GST-UNC5CL融合蛋白,并以其为抗原免疫家兔,制备抗人UNC5CL多克隆抗体,并鉴定其反应性和特异性.方法:用PCR方法扩增UNC5CL基因(表达其...
本研究探讨人源化重组CD25单克隆抗体(rhCD25MAb)对外周血T淋巴细胞活化、增殖的影响.应用植物血凝素(PHA)刺激外周血单个核细胞,不加或同时加rhCD25MAb或环孢菌素A(CsA)进行体...
目的: 制备纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PAP)的单克隆抗体(mAb).方法: 以从血浆中纯化的PAP免疫BALB/c小鼠.按常规方法融合, 以固相等分子浓度的纤溶酶原、α2抗纤溶酶(α2-AP)及P...
活化雌三醇(E3)C3处的酚-OH,与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备得E3的完全抗原.利用完全抗原免疫动物,采用单克隆抗体技术,经过细胞融合、克隆筛选、扩大培养、动物体内诱生等过程,最后获得了E3的...
制备了抗肌醇磷脂激酶(PI 4-K)单克隆抗体(A6D)并测定了抗原-抗体反应基本特性及功能.结果表明，单克隆抗体与固相及溶液中肌醇磷脂激酶的亲和常数分别为7.5×106和6&...
目的:对HCA518蛋白进行表达和纯化,并制备HCA518蛋白的单克隆抗体.方法:采用基因重组技术在原核系统表达HCA518蛋白,金属镍螯合的Ni-NAT亲和层析柱进行蛋白纯化;杂交瘤技术建立分泌HC...
目的:构建和表达一种可与卵巢癌细胞和淋巴细胞结合的双特异抗体.方法:利用PCR分别扩增抗人CD3单链抗体(single chain variable fragment, ScFv)重链可变区(vari...
目的:获得1A6/DRIM的N端特异性抗体并对其在细胞内的定位进行分析.方法:针对1A6/DRIM的N端多肽用多通道同步固相全自动合成系统合成,以无免疫原性的赖氨酸结构为核心偶联,将此多聚抗原肽(mu...
单克隆抗体(Monoclonal Antibody,MAb)183B2是该研究室用上皮性卵巢癌组织粗提液免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备的一株具有较好选择性的单抗.在免疫组化染色及放免显像中均显示较好的特...
采用基因工程技术,将小鼠6C6单克隆抗体可变区基因与人抗体恒定区基因连接,构建了鼠-人6C6嵌合抗体基因,并在CHO细胞中高效表达.利用Protein A亲和层析柱从细胞培养上清中分离纯化6C6嵌合抗...
目的:制备抗CMTM4的多肽抗体并鉴定其性能.方法:通过TMHMM、DNAStar等软件对CMTM4的3种剪接体,CMTM4-v1,v2和v3的蛋白序列进行分析,选取了4段序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素...
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目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定. 方法用重组 CYFRA21-1蛋白免疫 BALB/c 小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓...
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目的:对HCA518蛋白进行表达和纯化,并制备HCA518蛋白的单克隆抗体.方法:采用基因重组技术在原核系统表达HCA518蛋白,金属镍螯合的Ni-NAT亲和层析柱进行蛋白纯化;杂交瘤技术建立分泌HC...
目的:构建和表达一种可与卵巢癌细胞和淋巴细胞结合的双特异抗体.方法:利用PCR分别扩增抗人CD3单链抗体(single chain variable fragment, ScFv)重链可变区(vari...
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单克隆抗体(Monoclonal Antibody,MAb)183B2是该研究室用上皮性卵巢癌组织粗提液免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备的一株具有较好选择性的单抗.在免疫组化染色及放免显像中均显示较好的特...
采用基因工程技术,将小鼠6C6单克隆抗体可变区基因与人抗体恒定区基因连接,构建了鼠-人6C6嵌合抗体基因,并在CHO细胞中高效表达.利用Protein A亲和层析柱从细胞培养上清中分离纯化6C6嵌合抗...
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