A Modified Method of Isolation of Rat Retinal Pigment Epithelial Cells and the Expression of Matrix Metalloproteinases in the Cultured Cells

目的 探索和优化大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞分离培养的方法 , 评价RPE细胞的存活状态及细胞基质金属蛋白酶(MMP)的表达, 为相关眼底疾病的研究提供细胞来源. 方法 采用改良的三步酶消化法分离大鼠RPE细胞, 并进行细胞体外培养.倒置显微镜观察细胞形态, 细胞生长曲线评价不同培养代数的RPE细胞的增殖活力.免疫荧光检测CRALBP和角蛋白表达鉴定RPE细胞, 并观察不同培养代数RPE细胞中多种基质金属蛋白酶的表达. 结果 分离培养的RPE细胞可呈梭形、六角形, 并维持RPE细胞特征性蛋白CRALBP和角蛋白表达, 但细胞内色素成分随着细胞分裂和传代次数的增多逐渐减少.基质金属蛋白酶MMP2、MMP3、MMP9和MMP10在第1代和第3代RPE细胞中均表达阳性, 且表达强度未见明显改变. 结论 应用改良的三步酶消化法可以成功的分离培养大鼠RPE细胞, 并在第1代和第3代RPE细胞维持基质金属蛋白酶MMP2、MMP3、MMP9和MMP10的阳性表达.体外培养的大鼠RPE细胞为研究视网膜相关疾病提供了细胞模型.国家自然科学基金; 中国博士后科学基金中国科技核心期刊(ISTIC)中国科学引文数据库(CSCD)02109-112,后插2-后插31