目的克隆小鼠内皮抑素(Endostatin)编码区cDNA序列及测序鉴定并构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因表达载体.方法从小鼠肝细胞提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增获得全长Endostatin基因,测序并利用基因重组技术构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒.结果分光光度计测定50倍稀释的总RNA抽提产物,A260=0.834,A280=0.407,A260:A280=2.049,总RNA浓度为1.668g/L.EndostatincDNA的RT-PCR产物与载体pMD18T连接并经测序证实Endostatin序列与文献报道完全一致,并构建了含Egr-1启动子的IFNY和Endostain双基因共表达质粒pEgY-IFN(Y)-Endostatin.结论成功克隆小鼠Endostatin基因,构建了pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒.0z1184-18
EF-L1 (又稱為PRAP1) 在小腸表皮細胞表現,為一分泌到胞外之蛋白質。本實驗室先前的研究發現,在EF-L1基因剔除小鼠中,小腸絨毛上已分化的表皮細胞會展現過早的細胞凋亡現象。缺乏EF-L1表現...
目的 建立一个小鼠无精子症模型,并探讨Mm.158494基因在无精子症中的表达及意义.方法 建立无精子症小鼠模型,观察小鼠睾丸生精小管结构的变化.筛选与精子发生相关的睾丸特异性新基因,利用网络信息资源...
[[sponsorship]]生物醫學科學研究所[[note]]已出版;[SCI];有審查制度;具代表性[[note]]http://gateway.isiknowledge.com/gateway/...
目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR...
为研究骨骼肌及肿瘤内介导的内抑素基因转移对肿瘤生长的作用,利用基因克隆技术构建了内抑素基因真核表达质粒,应用电脉冲转移法将质粒转入转肿瘤小鼠骨骼肌或肿瘤中.结果表明,内抑素基因可在骨骼肌或肿瘤内表达,...
通过检索GenBank的表达序列标签(EST)数据库并结合cDNA末端快速扩增法(RACE),从小鼠胸腺克隆到一个新的cDNA序列,并从人类肝癌组织中克隆出了其同源cDNA.根据读码框架分析,这两个c...
目的:克隆胸腺细胞发育相关新基因.方法:应用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH),构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库,结合R...
目的摸清脂蛋白酯酶基因敲除小鼠的繁殖规律,建立可靠的检测方法.方法采用杂交、回交、互交的方法进行培育;采用从LPL(-/-)基因敲除小鼠的个体组织(鼠尾)中提取基因组DNA进行PCR分析,对其LPL(...
从真养产碱杆菌(Alcaligenes eutrophus)中克隆得到PHB合成的关键酶基因,NADPH依赖性的乙酰乙酰辅酶A还原酶基因phbB(GenBank ID:KC191672),其DNA长度...
目的 筛选与精子发生和(或)睾丸发育相关的基因.方法 将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA与小鼠睾丸DNA芯片进行杂交,通过杂交信号比较,筛选出差异表达基因.利用网络信息资源对该基因进行生物学信息分析...
通过RT-PCR方法,从129小鼠脑组织中克隆到CgA基因cDNA 5'端部分片段,序列分析结果表明,所克隆到的片段序列与文献中完全一致.以此片段为探针,从129小鼠基因组库中筛选获得...
目的培育转入CD59 cDNA首建小鼠,以进一步研究异种移植,并为建立鼠系奠定基础.方法构建转基因结构pEGFP-C1-OMT-CD59,限制性内切酶切除质粒载体,回收、纯化包括人CD59 cDNA、...
目的:构建人白细胞介素18受体IL-18Rα,β真核表达载体pcDNA3.1-zeocin/IL-18R α pcDNA3.0/IL-18R β,并将pcDNA3.0/IL-18R β稳定转染293细...
科学研究費補助金研究成果報告書研究種目: 基盤研究(C)研究期間: 2011~2013課題番号: 23500488研究代表者: 依馬 正次(滋賀医科大学・動物生命科学研究センター)新規Rho関連遺伝子...
目的:利用RNA干扰(RNAi技术,以人组织因子(TF)基因为靶基因,构建特异性的RNA干扰真核细胞表达载体.方法:根据GenBank提供的人TF基因的核苷酸序列,设计具有小发夹结构的2条DNA序列,...
EF-L1 (又稱為PRAP1) 在小腸表皮細胞表現,為一分泌到胞外之蛋白質。本實驗室先前的研究發現,在EF-L1基因剔除小鼠中,小腸絨毛上已分化的表皮細胞會展現過早的細胞凋亡現象。缺乏EF-L1表現...
目的 建立一个小鼠无精子症模型,并探讨Mm.158494基因在无精子症中的表达及意义.方法 建立无精子症小鼠模型,观察小鼠睾丸生精小管结构的变化.筛选与精子发生相关的睾丸特异性新基因,利用网络信息资源...
[[sponsorship]]生物醫學科學研究所[[note]]已出版;[SCI];有審查制度;具代表性[[note]]http://gateway.isiknowledge.com/gateway/...
目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR...
为研究骨骼肌及肿瘤内介导的内抑素基因转移对肿瘤生长的作用,利用基因克隆技术构建了内抑素基因真核表达质粒,应用电脉冲转移法将质粒转入转肿瘤小鼠骨骼肌或肿瘤中.结果表明,内抑素基因可在骨骼肌或肿瘤内表达,...
通过检索GenBank的表达序列标签(EST)数据库并结合cDNA末端快速扩增法(RACE),从小鼠胸腺克隆到一个新的cDNA序列,并从人类肝癌组织中克隆出了其同源cDNA.根据读码框架分析,这两个c...
目的:克隆胸腺细胞发育相关新基因.方法:应用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH),构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库,结合R...
目的摸清脂蛋白酯酶基因敲除小鼠的繁殖规律,建立可靠的检测方法.方法采用杂交、回交、互交的方法进行培育;采用从LPL(-/-)基因敲除小鼠的个体组织(鼠尾)中提取基因组DNA进行PCR分析,对其LPL(...
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通过RT-PCR方法,从129小鼠脑组织中克隆到CgA基因cDNA 5'端部分片段,序列分析结果表明,所克隆到的片段序列与文献中完全一致.以此片段为探针,从129小鼠基因组库中筛选获得...
目的培育转入CD59 cDNA首建小鼠,以进一步研究异种移植,并为建立鼠系奠定基础.方法构建转基因结构pEGFP-C1-OMT-CD59,限制性内切酶切除质粒载体,回收、纯化包括人CD59 cDNA、...
目的:构建人白细胞介素18受体IL-18Rα,β真核表达载体pcDNA3.1-zeocin/IL-18R α pcDNA3.0/IL-18R β,并将pcDNA3.0/IL-18R β稳定转染293细...
科学研究費補助金研究成果報告書研究種目: 基盤研究(C)研究期間: 2011~2013課題番号: 23500488研究代表者: 依馬 正次(滋賀医科大学・動物生命科学研究センター)新規Rho関連遺伝子...
目的:利用RNA干扰(RNAi技术,以人组织因子(TF)基因为靶基因,构建特异性的RNA干扰真核细胞表达载体.方法:根据GenBank提供的人TF基因的核苷酸序列,设计具有小发夹结构的2条DNA序列,...
EF-L1 (又稱為PRAP1) 在小腸表皮細胞表現,為一分泌到胞外之蛋白質。本實驗室先前的研究發現,在EF-L1基因剔除小鼠中,小腸絨毛上已分化的表皮細胞會展現過早的細胞凋亡現象。缺乏EF-L1表現...
目的 建立一个小鼠无精子症模型,并探讨Mm.158494基因在无精子症中的表达及意义.方法 建立无精子症小鼠模型,观察小鼠睾丸生精小管结构的变化.筛选与精子发生相关的睾丸特异性新基因,利用网络信息资源...
[[sponsorship]]生物醫學科學研究所[[note]]已出版;[SCI];有審查制度;具代表性[[note]]http://gateway.isiknowledge.com/gateway/...