Purification and functional characterization of recombinant MPIF-1β,a novel isoform of human chemokine MPIF-1

目的为深入研究趋化因子新变异体MPIF-1β的结构与功能,利用pKPL3a-MPIF-1β 表达质粒进行原核表达、纯化工艺研究及活性检测.方法 MPIF-1β重组蛋白以包涵体形式存在,占总菌体蛋白的 15%,工程菌经超声破碎,包涵体洗涤,变性、复性、肝素Sepharose CL-6B 亲和层析,CM Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200层析分离获得目的蛋白.结果还原SDS-PAGE分析相对分子质量15 000 u,纯度99.0%,纯化倍数6.6倍,总回收率9.07%.体外生物学活性检测证明MPIF-1β 重组蛋白对小鼠骨髓集落形成具有抑制作用,对U937细胞具有趋化活性,且呈一定的剂量依赖关系.结论建立了简便可行的MPIF-1β重组蛋白纯化路线,初步证明了MPIF-1β的生物学活性.中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)04311-3141