马尔尼菲青霉氧化应激反应相关基因SKN7的克隆及功能研究

目的:克隆双相真菌马尔尼菲青霉(PM)的氧化应激反应相关基因SKN7,并通过对酵母SKN7缺陷株的互补试验证明该基因是氧化应激反应相关基因.方法:提取PM标准株DNA及RNA后,通过简并PCR结合RACE技术克隆PM的SKN7基因;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)比较该基因在25℃及37'C温度下的表达;将该基因的cDNA插入酵母表达载体pY-ES2.0,转化酿酒酵母SKN7基因缺陷株,比较互补后酿酒酵母SKN7基因缺陷株对H2O2的抵抗能力是否增强.结果:PM的SKN7基因全长约2.5 kb,开放读码框为1 776 bp,推测编码592个氨基酸;包含4个内含子5个外显子及两个高度保守的结构域.该基因在双相温度表达量无变化,互补试验证明转化PM的SKN7基因后酿酒酵母SKN7基因缺陷株重新具有抵抗H2O2:杀伤的能力.结论:PM的SKN7基因是氧化应激反应相关基因,但并不是酵母相特异表达基因.中国科技核心期刊(ISTIC)0138-412