Experimental studies on differentiation of rat bone marrow Thy-1.1+ stem cells into hepatic stem cell-like cells in vitro

目的:分离培养大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞,探讨其肝分化条件及潜能.方法:分离大鼠骨髓细胞,Percoll密度梯度离心获取骨髓单个核细胞后免疫磁珠分选Thy-1.1+干细胞群,流式细胞术测定分选后细胞的纯度与表型.不同条件下诱导分化,用形态学观察、逆转录聚合酶链反应和免疫细胞化学法判定其所处的肝系分化阶段.结果:免疫磁珠分选Thy-1.1+细胞纯度达94.2%.Thy-1.1+细胞不表达CD34和c-kit;高表达β2微球蛋白和CD45;部分表达Flt-3.Thy-1.1+细胞在HGF/FGF-1/FGF-2诱导下呈多角形上皮状克隆样生长,诱导前后持续表达细胞角质素18,诱导过程中白蛋白的表达逐渐减少,甲胎球蛋白的表达逐渐增强.结论:免疫磁珠可有效分选Thy-1.1+细胞.Thy-1.1+细胞在HGF/FGF-1/FGF-2诱导下呈肝干细胞样细胞表现.国家高技术研究发展计划(863计划); 中国博士后科学基金; 湖北省科技攻关项目04215-217,插21