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Prokaryotic expression, purification and chemotaxis analysis of a novel murine CXC chemokine MTCK1/mPBP

李燕
付文先
朱梦嫘
陈慰峰

Publication date

January 2003

DOI

10.3760/j:issn:0254-5101.2003.06.019

Publisher

中华微生物学和免疫学杂志

Journal

0254-5101

Abstract

目的原核表达、纯化小鼠CXC亚家族趋化性细胞因子MTCK1/mPBP并测定其生物学活性. 方法构建原核表达载体pQE-30-MTCK1/mPBP;在大肠杆菌M15菌株中表达重组蛋白6xHis-MTCK1/mPBP,利用镍-亚硝胺乙酸-组氨酸(Ni-NTA-His)亲和层析法对重组蛋白进行纯化.采用Boyden小室对纯化的MTCK1/mPBP蛋白进行趋化活性分析. 结果通过优化表达和纯化条件,获得了重组MTCK1/mPBP蛋白,并对大肠杆菌包涵体蛋白进行变性和复性处理.趋化试验表明,原核表达的MTCK1/mPBP蛋白对转染有CXCR2受体的293细胞系具有明显的趋化能力,并呈现浓度依赖性. 结论利用原核表达系统,表达并纯化了重组趋化性细胞因子6xHis-MTCK1/mPBP蛋白,体外功能试验证实有生物学活性.国家重点基础研究发展计划(973计划)中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)06459-4632

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